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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

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[求助] 荧光定量怎么成了这样

我跑了荧光定量怎么撇腿呢？哪位大侠帮解决一下，谢谢。

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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！

1楼2011-08-03 10:47:32

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shuanyu0202

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

疯狂修行者(金币+2): 谢谢，我降低反应温度试试吧，引物我设了好多了，能出单峰的就很少，现在扩增效率又低，真郁闷！ 2011-08-12 14:16:55

引用回帖:

10楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-08-11 08:27:28:
现在扩增效率低怎么办？

怎么确定的扩增效率低呢？如果是因为CT值延迟的话，有几个原因：1.扩增效率低，反应条件不够优化。（设计更好的引物或探针；改用三步法进行反应；适当降低退火温度；增加镁离子浓度等）。
2.PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。
3.PCR产物太长。一般采用80-150bp的产物长度。
希望对你有所帮助，实验顺利。