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devil2006

木虫 (正式写手)

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[求助] 重组酿酒酵母转化子筛选的问题

最近在做工业酿酒酵母的基因重组试验，请问如果没有筛选标记（比如卡纳，营养缺陷型等），对醋酸锂转化后长出的单菌落，利用菌落PCR盲筛，有没有可能筛选出正确的转化子？

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1楼2011-08-01 13:37:11

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天落smile

新虫 (初入文坛)

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专业: 生物大分子结构与功能

引用回帖:

1138834楼: Originally posted by sadc at 2011-08-11 08:53:43
用5-FOA筛尿嘧啶缺陷型，这个是最常用的做法了。
然后依次可以得到多重营养缺陷型。
如果是二倍体的话，可以用产孢子培养基分到单倍体，分别做缺陷型后实现特定的基因操作再mate。
这个是很常规的酿酒酵母操作方 ...

用于啤酒酿造的URA3缺陷工业啤酒酵母菌株是多倍体，并且不生孢没法得到单倍体，可以构建营养缺陷型吗？谢谢。