| 查看: 5777 | 回复: 12 | |||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||||
lixiaojing1318
|
[交流]
荧光定量需要3个重复样本吗 已有8人参与
|
||||
|
荧光定量需要3个重复样本吗，还是只要一个样品，做3个重复？ 提完RNA后，需要定量到相同浓度吗？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生化实验经验积累 | 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有175人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光定量PCR的模板浓度
已经有12人回复
- 激光共聚焦显微镜对载体表面荧光标记蛋白质能定量吗？
已经有6人回复
- 荧光定量PCR扩增效率怎么做？？？？我要被逼疯了
已经有17人回复
- 荧光定量 Real time 引物设计为什么要跨内含子？
已经有4人回复
- RNA出现降解，还能做后面的荧光定量PCR吗？
已经有22人回复
- 荧光定量问题
已经有4人回复
- 为什么荧光定量后还要跑电泳呢
已经有15人回复
- 荧光定量怎么成了这样
已经有26人回复
- 荧光定量PCR中模板采用直接提取的DNA与构建目标片段质粒模板有什么区别？
已经有6人回复
- 该选哪个荧光定量PCR仪，ABI的stepone plus 和 Biorad的cfx96，用过的指点一下
已经有23人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR中用的 SRBY Green I与电泳上用的是一样的吗？还是不同类型�
已经有3人回复
- 【求助/交流】关于做荧光定量pcr的模板问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR能不能对多个模板同时进行定量
已经有5人回复
- 【求助】菜鸟一问：用荧光分光光度计如何定量？
已经有16人回复
lixiaojing1318 
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2955.2
- 散金: 149
- 红花: 5
- 帖子: 104
- 在线: 47.7小时
- 虫号: 868222
- 注册: 2009-10-11
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2011-07-20 22:08:45
足下客
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 10
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 1858.8
- 散金: 211
- 红花: 12
- 帖子: 888
- 在线: 110.4小时
- 虫号: 426612
- 注册: 2007-07-28
- 性别: MM
- 专业: 临床分子生物学检验
2楼2011-07-19 12:45:27
shaquila
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 1484.8
- 散金: 59
- 红花: 14
- 帖子: 553
- 在线: 182.3小时
- 虫号: 654839
- 注册: 2008-11-15
- 专业: 生物大分子结构与功能
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, EPI+1): 学习了！ 2011-07-19 16:25:52
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, EPI+1): 学习了！ 2011-07-19 16:25:52
|
你说的是biological replicate 和 technical replicate，一般每个样本做三到四个技术重复，这个貌似是荧光定量必需的 生物学重复就是可以独立重复提取两三次，分别进行实验，荧光定量最好需要生物学重复～～ 另外RNA量最好定在一个范围里面，虽然有内参基因校正，但是大部分综述推荐，这样好调整模版量，并且由于是扩增反应，在2ΔΔct如果扩增效率不平行，很可能误差会放大，因此ΔΔct也最好都做个标准曲线，样品浓度最好在标准曲线范围内。 摘自google～ A technical replicate involves the multiple labeling or reciprocal labeling of the same RNA sample. The purpose of a technical replicate is to control for technical variability within an experiment (array to array variation, reagent variation, dye incorporation, etc.) A well run experiment should have minimal variation thus minimizing the need for technical replicates. A biological replicate involves isolating RNA independently from replicate sources (multiple cell lines, multiple biopsies, multiple patients, etc). The purpose of a biological replicate is to control for biological diversity. Biological replicates are often more telling, and for this reason are “better” than technical replicates, however, biological replicates are often more difficult to obtain [ Last edited by shaquila on 2011-7-19 at 13:47 ] |
3楼2011-07-19 13:09:50
lixiaojing1318
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2955.2
- 散金: 149
- 红花: 5
- 帖子: 104
- 在线: 47.7小时
- 虫号: 868222
- 注册: 2009-10-11
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2011-07-20 22:11:13
