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linjl010

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[求助] 切胶回收时如何将3300与3800bp两条带分开

本人做酶切要回收目的片段，但是目的片段3300bp,载体3800bp，什么条件下电泳能将这两个片段分开，然后切胶回收。

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1楼 2011-07-06 10:43:54

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 很好，楼主照做应该ok！ 2011-07-06 17:16:05
linjl010(金币+5): 2011-07-07 08:40:50

跑长胶，我做过和楼主一样的事。

亚克隆的时候把pWEB:TNC里Amp抗性基因切了一刀，得到一个质粒，载体3.2，外源3.5，跟楼主一样的片段长度。电泳的时候上样量小，片段的条带窄，用5厘米的短胶能看得很清楚。回收外源的时候上样量大，跑了10厘米的长胶也能分开，就是切胶的时候切地窄一些，不能贪多，免得带上一点载体片段。电泳电压小一点就行，缓冲液是新换的TAE，0.8%的胶。