| 查看: 4424 | 回复: 14 | |||
| 本帖产生 2 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
电泳-分离胶凝得很慢！！
|
|||
|
各位虫友和老师，小虫是鲜嫩菜鸟，刚刚开始SDS-PAGE电泳。配制分离胶是10%的：三重水3.3ml，30%丙烯酰胺4ml，1.5mo/Ll Tris-HCl（pH 8.8） 2.5 ml，10%SDS 0.1ml，10% 过硫酸铵 0.1ml，TEMED 0.004 ml。制胶时几个小时都不凝，这是什么原因？是不是可以这样考虑： 1、30%丙烯酰胺中必须加甲叉双丙烯酰胺？好多资料显示需要加甲叉双丙烯酰胺，但我参照的是Bio-Rad提供的配制方法啊？郁闷。 2、按照老师的指点说，加胶后，等小烧杯里的胶开始凝，玻璃板中的胶就应该凝了。可是为什么几个小时才开始凝？我试着增加了过硫酸铵和TEMED的用量，凝结的速度倒是很快，不知道这样影响结果不？ 3、即使胶凝结之后，我发现其硬度不够大，会给后期带来不便？怎么办？ 3、可不可以考虑换种分离胶的配方？希望虫友提供建议。 希望论坛内的筒子们多给建议，万分感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
梦想
已经有8人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有19人回复
-
面上合作单位盖章
已经有9人回复
-
面上函评意见出来了，像什么等级？
已经有17人回复
-
为什么国自然不能直接公布
已经有5人回复
-
学科评审组评审是指会评吗？
已经有4人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有14人回复
-
小白求助 投论文要求的highlights应该如何写
已经有4人回复
-
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有12人回复
-
怎么看青基中了没有啊
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 琼脂糖凝胶电泳跑的时间长了是不是就会出现拖尾呀？
已经有10人回复
- SDS-PAGE 电泳分离胶发白什么原因？
已经有13人回复
- 【资料】聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质技术实验分析
已经有125人回复
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳
已经有7人回复
- SDS-page 分离胶不凝固
已经有19人回复
- 求助mRNA分离和凝胶电泳
已经有3人回复
- 大家帮忙看一下，好奇怪，我的电泳图，三个加样孔在分离胶合在一起了
已经有7人回复
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳灌胶后能放多久
已经有17人回复
- PAGE凝胶蛋白电泳用（梳孔有残留胶）
已经有15人回复
- 【求助/交流】怎么样跑琼脂糖凝胶电泳 能将250bp 和290 bp的片段分离
已经有28人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶浓度问题
已经有11人回复
- 【请教】量子点与抗体连接后，用SDS电泳确定连接时，量子点无法进入分离胶。。。
已经有20人回复
- 【求助/交流】凝胶电泳时如何分开大小相差10-20个碱基对的目的条带
已经有4人回复
- 【求助/交流】电泳分离胶pH的问题
已经有6人回复
14楼2011-08-18 23:46:23
2楼2011-06-30 17:56:28
4楼2011-06-30 19:10:49
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看天(金币+3): 鼓励回答 2011-06-30 23:10:02
lizhijiang(金币+1): 多谢你！ 2011-07-01 08:13:25
silicare(EPI+1): 2011-07-02 14:46:27
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看天(金币+3): 鼓励回答 2011-06-30 23:10:02
lizhijiang(金币+1): 多谢你！ 2011-07-01 08:13:25
silicare(EPI+1): 2011-07-02 14:46:27
|
1。如楼上所说，甲叉双丙烯酰胺是必须加的，形成网络的重要组成 2。TEMED多加肯定凝的快，无甚影响，最怕加太多还没灌胶就凝了就不好了。 3。说实话，不知道你的没加甲叉的胶是怎么凝的！你说的多软没概念…… 3。胶的配方是全部一样的，唯一的不同就是30%浓缩胶的用量不同，换配方的事情就不要想了 |
5楼2011-06-30 22:45:09
5