| 查看: 2992 | 回复: 14 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
yanhui8558金虫 (小有名气)
|
[求助]
重叠pcr\跳跃pcr的问题
|
|
|
我现在在进行重叠pcr，想要把一段基因中间的内含子去除，上游片段1600左右，下游片段500左右，先分别p出上下游片段，然后进行重叠延伸步骤。实验条件如下： 中间上片段下引物和下片段上引物重叠区域大概50个bp，先不加入引物，让上下游引物自连，用的是pcr混合物，pcr条件： 94度3分钟，94度45秒，40度30秒，72度，1分40秒，72度10分钟，2-4步循环10次，然后加入上片段上引物和下片段下引物，pcr条件： 94度3分钟，94度45秒，50度30秒，72度，2分，72度10分钟，2-4步循环30次. 延伸温度也做过50-65的梯度，也加入过DMSO 试验过， 可是一直没有成功，忘各位大侠指导，或者可以指出可能是哪方面的问题啊，感激不尽  |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有129人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- overlap PCR之问题
已经有16人回复
- 重叠PCR应该怎么做？
已经有9人回复
- 重叠延伸PCR设计引物
已经有3人回复
- 重叠PCR克隆大片段
已经有4人回复
- 如何设计重叠延伸PCR引物
已经有14人回复
- 【求助/交流】重叠PCR问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】重叠PCR的问题???
已经有7人回复
- 【求助/交流】重叠延伸pcr第二轮条带较弱，弥散
已经有12人回复
yanhui8558
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1765
- 散金: 3
- 帖子: 172
- 在线: 66.7小时
- 虫号: 660663
- 注册: 2008-11-23
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2011-06-23 17:00:32
2楼2011-06-23 16:53:04
gwbk
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 54
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2293.5
- 红花: 24
- 帖子: 529
- 在线: 186.9小时
- 虫号: 1320681
- 注册: 2011-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2011-06-23 20:40:36
yanhui8558
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1765
- 散金: 3
- 帖子: 172
- 在线: 66.7小时
- 虫号: 660663
- 注册: 2008-11-23
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2011-06-24 18:46:36
50