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tongxinkxy

银虫 (小有名气)

[求助] 250bp,可以直接测序,不转载体吗?

250bp,可以直接测序,不转载体吗?
可以用双向测序,就可以得到全部确切的序列,这样理解对吗?
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段家一凡

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yixuanwin at 2011-06-19 21:27:10:
1   pcr产物测序,需要非简并引物

2  如果特异引物扩增,条带浓度达到回收要求,可以pcr产物测序。

3  根本不需要双向,一个反应足够了。

4  鉴于pcr产物测序会损失部分序列,结果肯定没有200bp了。 即便 ...

两点错误,当然需要双向测序,一个方向测就会导致引物后几十个碱基不确定,双向测就可以根据另一端测过来的序列补上。实际上PCR产物测序是最准确的,连到载体测很有可能出错。
10楼2011-06-20 16:39:03
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