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paulajjh

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[交流] 重组蛋白聚集

各位虫友，最近表达了一种人源的蛋白，在大肠中表达，采用亲和柱纯化后本打算超滤浓缩，然后透析除盐的，可是在超滤与除盐的过程中一直出现白色絮状物，我觉得有可能是蛋白聚集了，但我很担心，照这样聚集下去，酶活要全部没掉了。
各位如有出现过类似的现象，可否告诉我为什么会一直出现聚集的现象，如何防止这种聚集。
谢谢。

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1楼 2011-06-08 16:50:57

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paulajjh

木虫 (著名写手)

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引用回帖:

Originally posted by thinkingers at 2011-06-08 17:20:31:
我做过重组降糖多肽的表达，浓缩的时候用的是透析袋，分子量不大，外面用分子量2W的聚乙二醇来吸水

透析除盐，怎么透析的？用超纯水、透析袋？是在哪个地方，比如透析袋内还是外中有白色絮状物？

用透析袋除盐，里面为亲和柱后的液体，外面为低盐缓冲液，袋中有白色絮状物。
有一位同事说是没关系，继续透，透到平衡了就不再有聚集了，我透到今天为止，已经2天了，一直有白色絮状物出现。