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donnafeng

金虫 (小有名气)

[求助] 重组蛋白可能是1-4聚体 低咪唑峰后头跟了三个峰

像这种情况是不是单体 二聚体 四聚体 按顺序分别洗出来啊
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biowandy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3): 谢谢参与 2011-06-10 12:16:00
donnafeng(金币+5): 谢谢回帖 蛋白洗脱峰很宽是什么意思啊 能具体解释一下吗 2011-06-11 14:57:59
引用回帖:
Originally posted by donnafeng at 2011-06-09 18:18:43:
像这种情况是不是单体 二聚体 四聚体 按顺序分别洗出来啊

不是,洗脱峰跨越很大的范围只能说这个蛋白洗脱峰很宽,不代表多聚体,

想证明多聚体最好是跑Native的胶,或者用分子筛
2楼2011-06-10 10:21:17
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biowandy

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 感谢参与 2011-06-12 19:14:16
引用回帖:
Originally posted by donnafeng at 2011-06-09 18:18:43:
像这种情况是不是单体 二聚体 四聚体 按顺序分别洗出来啊

只要是色谱技术,有时候就会遇见峰形图的每一个组分的峰不是一个尖尖的峰,而是一个很宽的平滑上下的峰。 这就是宽峰。 这是某些蛋白的性质,当然有时候出现这种情况也是柱子填充不好导致的。但是在亲和层析中,我遇见很多次,只能说目标蛋白因为某种原因和亲和介质结合的能力有差异,导致洗脱的时候不是一起下来,而是在不同的浓度的洗脱液下洗脱下来。其实就是一种状态的分子
3楼2011-06-11 19:47:09
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donnafeng

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by biowandy at 2011-06-11 19:47:09:
只要是色谱技术,有时候就会遇见峰形图的每一个组分的峰不是一个尖尖的峰,而是一个很宽的平滑上下的峰。 这就是宽峰。 这是某些蛋白的性质,当然有时候出现这种情况也是柱子填充不好导致的。但是在亲和层析中 ...

懂了 谢谢
4楼2011-06-12 09:50:56
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