| 查看: 2403 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
xinyaolu木虫 (小有名气)
|
[求助]
疏水柱为何挂不上蛋白，求解！
|
||
 本人在做蛋白纯化，使用了GE的pheny（high sub ）预装柱。蛋白用40%硫酸铵沉淀后，分别用含有0.5M，1M，1.5M 硫酸铵或者2M Nacl 的50mM pH7.0的磷酸钠缓冲液复溶，膜过滤后均有检测到酶活。当用高盐溶液平衡柱子后，发现没有任何蛋白挂上柱，随后的洗脱过程中一点蛋白峰都没有，连咋蛋白都没有。 透过液中有检测到酶活。 我的蛋白在40%硫酸铵中基本都沉淀下来。 让我纠结的是为何一点蛋白都没挂上，连杂蛋白都没有 向各位求解！ |
回复此楼» 猜你喜欢
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有15人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有18人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有15人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有7人回复
-
朋友圈看到的
已经有9人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有16人回复
-
放榜前的不淡定
已经有17人回复
-
科研孤儿太难了
已经有19人回复
-
明天应该可查了！？
已经有4人回复
-
什么时候开奖？
已经有11人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 氧化/还原活性的蛋白质粘附在膜上，质谱中氧化/还原的质荷比
已经有5人回复
- 传说现在又流行镁电池了？求解
已经有39人回复
- 研究细胞信号转导通路，建立细胞系，是否一定要敲出细胞内源性蛋白分子？
已经有8人回复
- 疏水层析蛋白洗不下来怎么办
已经有10人回复
- 青基成员挂不挂教授啊？可以相互挂名吗？参与人需要简介吗？
已经有16人回复
- 是不是只要挂外单位的人员名字就要盖合作单位公章？
已经有5人回复
- 关于Ni-NTA纯化蛋白
已经有19人回复
- 蛋白纯化时变性剂能用异硫氰酸胍代替盐酸胍吗
已经有6人回复
- 求解蛋白酶测定过程中滴加碳酸钠后出现沉淀，附详细过程~~~
已经有3人回复
- 融合蛋白不挂柱，急！
已经有7人回复
- 奇怪的质粒电泳图，求解。。
已经有3人回复
- his标签蛋白纯化，不挂柱
已经有18人回复
- 【求助/交流】蛋白Maker的条带问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】关于蛋白浓度测定
已经有5人回复
- 【求助/交流】蛋白不挂柱怎么办
已经有11人回复
- 求解：硫酸钡的分散剂
已经有3人回复
- 基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
已经有26人回复
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19818.5
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6621
- 在线: 2794小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
4楼2011-06-08 15:11:37
jessica2010
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 24.7
- 散金: 30
- 红花: 6
- 帖子: 216
- 在线: 171.7小时
- 虫号: 1044254
- 注册: 2010-06-20
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2011-06-08 08:57:06
xinyaolu
木虫 (小有名气)
- BioEPI: 2
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2053.7
- 散金: 12
- 帖子: 80
- 在线: 111.8小时
- 虫号: 867815
- 注册: 2009-10-10
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2011-06-08 12:54:58
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19818.5
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6621
- 在线: 2794小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
5楼2011-06-08 23:00:41
20