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xinyaolu木虫 (小有名气)
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疏水柱为何挂不上蛋白,求解!
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本人在做蛋白纯化,使用了GE的pheny(high sub )预装柱。蛋白用40%硫酸铵沉淀后,分别用含有0.5M,1M,1.5M 硫酸铵或者2M Nacl 的50mM pH7.0的磷酸钠缓冲液复溶,膜过滤后均有检测到酶活。当用高盐溶液平衡柱子后,发现没有任何蛋白挂上柱,随后的洗脱过程中一点蛋白峰都没有,连咋蛋白都没有。 透过液中有检测到酶活。 我的蛋白在40%硫酸铵中基本都沉淀下来。 让我纠结的是为何一点蛋白都没挂上,连杂蛋白都没有 向各位求解! |
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冼亮淀粉酶
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4楼2011-06-08 15:11:37
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5楼2011-06-08 23:00:41









本人在做蛋白纯化,使用了GE的pheny(high sub )预装柱。蛋白用40%硫酸铵沉淀后,分别用含有0.5M,1M,1.5M 硫酸铵或者2M Nacl 的50mM pH7.0的磷酸钠缓冲液复溶,膜过滤后均有检测到酶活。
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