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xinyaolu木虫 (小有名气)
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疏水柱为何挂不上蛋白，求解！
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 本人在做蛋白纯化，使用了GE的pheny（high sub ）预装柱。蛋白用40%硫酸铵沉淀后，分别用含有0.5M，1M，1.5M 硫酸铵或者2M Nacl 的50mM pH7.0的磷酸钠缓冲液复溶，膜过滤后均有检测到酶活。当用高盐溶液平衡柱子后，发现没有任何蛋白挂上柱，随后的洗脱过程中一点蛋白峰都没有，连咋蛋白都没有。 透过液中有检测到酶活。 我的蛋白在40%硫酸铵中基本都沉淀下来。 让我纠结的是为何一点蛋白都没挂上，连杂蛋白都没有 向各位求解！ |
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xinyaolu
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