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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 同样的东西PCR结果怎么就不一样呢
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苏拉的世界

金虫 (著名写手)

[交流] 同样的东西PCR结果怎么就不一样呢

我用同一批菌液提的质粒，第一批做了两回PCR，第一回有结果第二回就没有结果，提的第二批质粒，做PCR就又有结果，用的引物还有其他材料都是一样的，而且做了对照，证明材料没被污染，怎么就这样了呢。这说明片段连上了还是没有啊？各位师兄师姐同届的哥们姐们你们有没有遇见相同的问题，拜托交流一下啦
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wolf19860510

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1楼 2011-06-07 17:03:58
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甲子沫

金虫 (正式写手)
★ ★
苏拉的世界(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+1): 这个可以有 2011-06-07 18:22:50
是不是有什么忘记加了？
本人比较粗心 以前没P出来是因为忘记加东西了 汗一个
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苏拉的世界
2楼2011-06-07 17:12:30
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苏拉的世界

金虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by 甲子沫 at 2011-06-07 17:12:30:
是不是有什么忘记加了？
本人比较粗心 以前没P出来是因为忘记加东西了 汗一个

不会啊，都记得加了
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3楼2011-06-07 17:30:37
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wolf19860510

铜虫 (初入文坛)
★
苏拉的世界(金币+1):谢谢参与
送鲜花一朵
祝早日解决这个问题哈
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4楼2011-06-07 18:02:03
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
★
苏拉的世界(金币+1):谢谢参与
介个要是什么都没有漏加
什么都一摸一样的话
就只能归在不可知因素导致实验不是结果
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5楼2011-06-07 18:51:10
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匿名

用户注销 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
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6楼2011-06-07 21:24:43
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susizheng

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
酶切啊。最有说服力。
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7楼2011-06-08 08:12:24
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苏拉的世界

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-06-08 08:12:24:
酶切啊。最有说服力。

谢谢啊！！！
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8楼2011-06-08 08:35:23
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苏拉的世界

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 彬心玉壶 at 2011-06-07 21:24:43:
PCR不稳定这个很正常，又不是优化PCR的条件，只是检测克隆而已。有就可以了，如果不放心，最好还是用酶切验证一下。看看酶切图谱。
最好双酶切，选一个插入片段上有，而载体没有的酶切位点，选一个载体上有，而插 ...

是我们自己构建的载体哦
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9楼2011-06-08 08:35:54
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功夫熊猫9527

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也经常有这种情况 有时换个pcr仪或换个环境 条件什么的就会好些 很神奇 什么都没变 他想出来就出来 不想出来就不出来
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10楼2012-05-11 13:36:32
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fly12365

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PCR出现这种情况很正常，我也遇到这样的情况。解决终极方法测序和酶切，要是能切下目的片段证明连上了。PCR就是小女孩的脸，变化无常
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11楼2012-05-12 22:08:44
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