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zhangby2002银虫 (小有名气)
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[求助]
那位大虾说说能否用聚丙烯酰胺检测DNA和RNA??
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| 原来一直用琼脂糖电泳检测DNA和RNA,自己第一次用8﹪的聚丙烯酰胺来检测DNA和RNA 失败，连Marker都跑的不好，DNA和RNA更不用说啦，目的带没跑出来？啥原因呀？？请大虾们解释一下！ |
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yj507
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2楼2011-06-04 13:51:00
caisanrenju
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【答案】应助回帖
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西瓜(金币+5, EPI+1): 这些问题确实容易被新手忽略 2011-06-05 09:16:52
zhangby2002(金币+1): 2011-06-05 09:56:05
西瓜(金币+5, EPI+1): 这些问题确实容易被新手忽略 2011-06-05 09:16:52
zhangby2002(金币+1): 2011-06-05 09:56:05
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丙烯酰胺胶跑DNA/RNA是绝对没问题的。不知道你用PAGE跑的目的是什么？ PAGE有两个地方必须注意的： 1。必须为非变性聚丙烯胺胶，即跑蛋白的那一套要丢掉，特别是SDS，肯定不能用的。也不必分为浓缩胶和分离胶，当然电泳缓冲液也不能是蛋白的，1XTAE/TBE就可以了 2。如果你的DNA片段超过100bp的话，建议你用6%，甚至以下的PAGE浓度，电泳的电压和时间也要相应长些。 3。电泳完毕后的染色也比较关键。 |
3楼2011-06-04 21:36:53