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hc1027

木虫 (正式写手)

[求助] 酶基因表达量高,酶活性就一定高吗?(请大家帮帮忙,谢谢)

1、请问大家,用qPCR研究酶基因在不同阶段的表达情况,结果发现不同阶段酶活性的大小与酶基因的表达量不一致,这是什么原因呢?
2、酶基因表达量高,酶活性就一定高吗?这两者有相关性吗?之间有什么影响因素呢?
3、请问大家用qPCR研究酶基因在不同阶段的表达情况,那能得到什么稍微宏观点的结论呢?(如果知道某基因的表达增加了,某基因的表达减少了)
谢谢大家
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5): 鼓励交流 2011-05-30 18:52:00
hc1027(金币+5): 非常感谢 2011-05-30 19:55:39
这个其实很难说,基因表达量高只能说明合成的多肽链数量比较多,但是从多肽链到具有活性的酶还需要很复杂的修饰折叠等等~~
比方说你表达是糖蛋白,就存在糖基化的问题,糖基化不足或者过糖基化都会对酶活力有影响,多肽链合成很多但是糖基化不足当然酶活力不会随基因表达量成正比~~
再比如说大肠杆菌有包涵体的问题,包涵体形式的蛋白是没有生物活性的~~~~
我觉得有可能是你的表达系统的原因,因为多肽链的修饰折叠主要是你的表达系统的作用而不是基因编码的作用~~
6楼2011-05-30 18:50:36
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beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, EPI+1): 楼主说有用哦 2011-05-31 08:18:50
发表个人观点:
一、基因表达量和酶活性是两个独立的概念,所以要分清楚,不要认为表达量高酶活性就高,表达量低酶活性就低
二、研究基因表达量和酶活性之间的关系,要以你所研究内容事实为分析对象,要把两者分开来研究,首先研究基因的表达情况,是高还是低,如果是定量的话,要用数据描述一下这个基因在条件变化时是怎样变化的,其次是在了解这个基因产物即蛋白的功能基础上要做蛋白功能的变化研究,然后把这2者联系起来加以分析,是正相关还是负相关或是其他情况就有待于你自己的分析了,最后在实验的基础上得出你的实验结论,当然还可以通过其他方法对你的实验结论加以进一步的验证是最好的。不管怎么样,分析和讨论是少不了的也是必要的,关键的就是你自己要认真的去做就会有收获~
乱侃,别介意啊~祝实验顺利噢~
8楼2011-05-30 22:07:57
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cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
hc1027(金币+6): 非常感谢 2011-05-30 18:42:34
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-05-30 18:51:17
引用回帖:
Originally posted by hc1027 at 2011-05-30 17:49:08:
1、请问大家,用qPCR研究酶基因在不同阶段的表达情况,结果发现不同阶段酶活性的大小与酶基因的表达量不一致,这是什么原因呢?
2、酶基因表达量高,酶活性就一定高吗?这两者有相关性吗?之间有什么影响因素呢? ...

酶的mRNA表达和蛋白表达和活性没有直接关系。

mRNA--》protein 过程中有microRNA调节,
protein活化方面有泛素化,磷酸化,这些都是不定因素

酶的活性还和活性集团的激活有关,

所以您的问题很难回答啊。。。。
2楼2011-05-30 18:16:12
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yguang

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
hc1027(金币+5): 非常感谢你的回复! 2011-05-30 18:43:35
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-30 18:51:27
不一定,而且很多时候恰恰相反,因为过度蛋白表达给细胞带来过重负担!
3楼2011-05-30 18:26:35
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hc1027

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by cdl007 at 2011-05-30 18:16:12:
酶的mRNA表达和蛋白表达和活性没有直接关系。

mRNA--》protein 过程中有microRNA调节,
protein活化方面有泛素化,磷酸化,这些都是不定因素

酶的活性还和活性集团的激活有关,

所以您的问题很难回答 ...

谢谢你的回复,请问用qPCR研究酶基因在不同阶段的表达情况,那能得到什么稍微宏观点的结论呢?(如果知道某基因的表达增加了,某基因的表达减少了)
4楼2011-05-30 18:43:07
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hc1027

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yguang at 2011-05-30 18:26:35:
不一定,而且很多时候恰恰相反,因为过度蛋白表达给细胞带来过重负担!

如果是相反的话,能得到什么有用的结论吗?可以用在学论文中的。

我之前测酶活性就是想看酶活性与酶基因表达的关系的,现在都不知道如何分析了,不同阶段酶基因的表达变化能得到什么宏观点的结论呢?谢谢
5楼2011-05-30 18:46:25
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arokas

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 感谢交流 2011-05-31 08:19:02
不一定,基因表达水平高和表达的蛋白量高是两个范畴。中间牵扯mRNA的稳定性,mRNA二级结构对翻译效率的影响,以及蛋白的正确折叠以及翻译后修饰等过程。任何一个过程出问题都会成为活性蛋白产量不足的限制性瓶颈。
10楼2011-05-30 23:26:54
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普通回帖

gagalady

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-05-30 19:48:14
hc1027(金币+4): 谢谢 2011-05-30 19:56:34
恩  没做过这个  但是说点自己的看法
这个酶的表达量高 说明对这个酶的需求量多  
但不代表这个酶的活性就是高的
酶活的定义是在特定条件下,1分钟内转化1微摩尔底物,或者底物中1微摩尔有关基团所需的酶量。
说的简单点  同样底物需要表达量很高的酶才能作用完毕,是不是说明这个酶的活力是低的呢
7楼2011-05-30 19:16:19
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hc1027

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by beautybanana at 2011-05-30 22:07:57:
发表个人观点:
一、基因表达量和酶活性是两个独立的概念,所以要分清楚,不要认为表达量高酶活性就高,表达量低酶活性就低
二、研究基因表达量和酶活性之间的关系,要以你所研究内容事实为分析对象,要把两者分 ...

很有用的建议,非常感谢
9楼2011-05-30 22:49:59
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