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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 求助RNA浓度的问题
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幽幽蓝

新虫 (小有名气)

[求助] 求助RNA浓度的问题

各位大侠，请问检测RNA浓度时会在230和280的地方出现两个峰，而260的地方却没有峰，是怎么回事呢？
同样的血清样本，有的检查出来的RNA浓度很低100+点，有的却高达3000+多，实验室的老师说没有必要跑电泳，是这样吗？
本人没有搞过实验，不懂，紧急求助
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1楼 2011-05-29 16:22:22
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andy99990000

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

幽幽蓝(金币+10): 2011-05-31 17:07:14
对于纯度，无论RNA还是DNA,你要看的就是260/280这个数值，注意是比值而不是单独的看绝对值或峰值。一般这个值在1.8 - 2.0，被视为纯度较高，可以继续你的后续实验，不然就要纯化。

对于浓度，这个就要看你后续实验的需求量了，由于提总RNA时浓度随着样品的不同，其产量差异的确会比较大，你的情况也是正常，我建议如果以前没有做过，那么继续你的实验，提纯时是可以多次样品一起做的，所以前期不必担心太多，总量到时能够达到就行。
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2楼2011-05-30 03:40:57
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幽幽蓝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by andy99990000 at 2011-05-30 03:40:57:
对于纯度，无论RNA还是DNA,你要看的就是260/280这个数值，注意是比值而不是单独的看绝对值或峰值。一般这个值在1.8 - 2.0，被视为纯度较高，可以继续你的后续实验，不然就要纯化。

对于浓度，这个就要看你后续 ...

恩，谢谢啊，因为样本珍贵，丢失一个就不会再有，所以只有继续，呵呵
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不开口，没有人知道你想要什么；不去做，任何想法都只在脑海里游泳；不迈出脚步，永远找不到你前进的方向
3楼2011-05-30 15:57:46
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seahow

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

260不会没有峰值的，再看看是否错了； 如楼上所说，260/280是纯度的代表，不过，你用trizol一般不会超过1.8的，1.6既可以接受的；

至于230那时金属离子。
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4楼2011-05-31 14:51:51
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seahow

木虫 (著名写手)
关于，是否跑胶 我到觉得没有必要，因为每次跑胶很麻烦，而且条件苛刻，以医学生水平，很难胜任的；因此，跑胶后 你也做不出什么干脆的判断，呵呵、
如果，条件摸好后，不必每次跑胶。
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5楼2011-05-31 14:54:36
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洪娜2012

新虫 (初入文坛)
今天试剂盒提的总RNA浓度1400，260/280 2.2，感觉还可以。可是纯化后的浓度很低，OD值也不好。怎么回事呢？难道是纯化过程中污染了？
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6楼2013-05-28 22:00:37
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