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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 没有polyA怎么逆转录？
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biofeixue

木虫 (著名写手)

[求助] 没有polyA怎么逆转录？

我最近查了一些基因，想看看他们受环境的影响是表达多了还是少了？
结果发现这些基因的3端都没有polyA尾巴，为什么？另外如果没有polyA尾巴，我怎么逆转录？
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1楼2011-05-27 09:21:03
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yj507

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

biofeixue(金币+5): 2011-05-28 15:04:50
biofeixue(金币+1): 2011-06-07 08:18:06
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2011-05-27 13:58:39:
没有polyA就不用oligo dT，这个实验他的目的就是想看该基因的表达，那么不用oligo dT最好，因为oligo dT是非特异性的，用来做所有mRNA的反转录有用，用来做特异基因的哪有什么意义

顶起~
提取RNA后，直接设计该基因的特异引物和看家基因引物做RT，然后QPCR定量就可以比较表达量的差异了。oligodT或N6是对所有polyA或转录本逆转，对于这个实验更麻烦。
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7楼2011-05-27 17:12:45
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