应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA测序求助
51/1返回列表
查看: 1591  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lihongyeer

金虫 (正式写手)

[求助] DNA测序求助

想通过16s rDNA来对微生物进行鉴定，但测序公司回复说：“您的样品（12株）的1492R向    的测序结果出现了重叠峰，测序失败，这有可能是您的模板存在污染，或是由于引物与模板的结合性不单一，导致扩增过程中有大小相近的非特异性条带杂片段产生，而琼脂糖回收无法分离这样的片段所致，建议您改进实验条件重新提供样品”
菌株我是通过四轮分离纯化的，应该不会全部污染，引物我用的是通用引物1492r和27f，DNA提取使用的天根生化的细菌基因组DNA提取试剂盒，请问各位有经验的虫友，现在该怎么做？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
Strivetomakeeverydayjoyfulandmeaningful！
1楼 2011-05-18 15:17:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
克隆测序呗。。。
回复此楼
4楼2011-05-18 21:53:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): good 2011-05-18 19:16:34
lihongyeer(金币+5): 多谢建议 2011-05-18 19:18:27
用的是通用引物，PCR只要污染一点其他的模板就会出现重叠峰的，不需要全部污染。
菌株进一步分离纯化再做PCR，或者重新PCR送样。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-05-18 18:42:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihongyeer

金虫 (正式写手)
好大的一项工程哇
赞一下 回复此楼
Strivetomakeeverydayjoyfulandmeaningful！
3楼2011-05-18 21:18:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

lihongyeer(金币+1): 2011-06-10 16:04:19
由于是通用引物产物同源性太高，所以楼主需要筛片段。连载体筛单斑
赞一下 回复此楼
5楼2011-05-23 00:00:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭