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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母转化表达
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2585165

金虫 (正式写手)

[交流] 毕赤酵母转化表达 已有7人参与

周围做毕赤酵母的人不是很多，所以积攒了挺多问题的，希望大家能帮帮忙。
  1，毕赤酵母转化后在MD板子上，长几天后竟然变色了，差不多算是红色吧，是不是死掉了呢？
  2，同样的条件，除了质粒不相同外，上周转化的效果很好，而这周就只有小小的菌苔，长着长着也都死掉了。纠结中。
  3，关于毕赤酵母感受态的制作，1M DTT大家是用水还是缓冲液配制的？而两种不同的配制方法，对于感受态的转化效率是否有影响？
  现就这么多问题，希望大家能帮忙看看。
  大家有什么问题也都可以提一下，要是能帮上的一定竭尽全力。
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1楼 2011-05-12 10:09:31
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liby

铜虫 (初入文坛)
★
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红色的是染菌了。主要是试剂，如：山梨醇。
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2楼2011-05-12 12:56:16
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roomofxw

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): good 2011-05-12 18:57:55
有一种红酵母，是红色的。
用过GS115印象是白色的，所以可能是染菌了。
做的电转，感受态用山梨醇洗的，印象中没用DTT，反正也转出来了。
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3楼2011-05-12 13:01:42
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2585165

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by liby at 2011-05-12 12:56:16:
红色的是染菌了。主要是试剂，如：山梨醇。

感受态是同一批的，整板子都是先是白色，长一长就不长了，然后变色了，估计是挂了。
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4楼2011-05-12 13:45:21
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2585165

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by roomofxw at 2011-05-12 13:01:42:
有一种红酵母，是红色的。
用过GS115印象是白色的，所以可能是染菌了。
做的电转，感受态用山梨醇洗的，印象中没用DTT，反正也转出来了。

染菌的可能性不大，因为整个板子长的很均匀。
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5楼2011-05-12 13:46:09
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hulanzi

新虫 (初入文坛)
★
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没有遇到过，都是白色的菌斑
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6楼2011-06-10 16:06:52
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huaren125

禁虫 (初入文坛)
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7楼2011-07-17 16:22:08
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2585165

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by huaren125 at 2011-07-17 16:22:08:
电击转化用的是山梨醇，我的也是有一次都是红的菌落，现在又出现黄的菌落，不知道是什么东东啦？

红的菌落应该是染菌了，黄的是因为死掉了。
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哎呀呀，别老说我丑，比起小时候，我这还真算是漂亮了！
8楼2011-07-17 23:12:46
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huaren125

禁虫 (初入文坛)
★
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本帖内容被屏蔽
9楼2011-07-18 19:48:24
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2585165

金虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励回帖热心交流 2011-07-20 00:03:27
引用回帖:
Originally posted by huaren125 at 2011-07-18 19:48:24:
我的MD培养基成分都灭菌啦（YNB,G），是不是灭菌后效果不好啊？

这个就不知道了，但是YNB不是都是过滤除菌的么？
还有菌死掉的原因很多，不是只有培养基的问题。
也有可能是感受态以及转化的问题。
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哎呀呀，别老说我丑，比起小时候，我这还真算是漂亮了！
10楼2011-07-19 23:26:07
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