毕赤酵母转化表达 - 分子生物 - 综合其他 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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兔兔yy070330

铜虫 (初入文坛)

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wanhscn(金币+3): 鼓励新虫参与交流！ 2011-09-05 22:13:46

引用回帖:

1楼: Originally posted by 2585165 at 2011-05-12 10:09:31:
周围做毕赤酵母的人不是很多，所以积攒了挺多问题的，希望大家能帮帮忙。
1，毕赤酵母转化后在MD板子上，长几天后竟然变色了，差不多算是红色吧，是不是死掉了呢？
2，同样的条件，除了质粒不相同外，上周转 ...

我做电转后也出现过红色的菌落，这个应该是染菌没错啦。至于感受态的制作，我是电转的，用YPD摇菌至OD600=1.3-1.5，然后离心，用预冷的无菌水重悬菌体（2次），离心然后拿1M的预冷山梨醇洗一次，最后用1Ml山梨醇重悬，分装后就可以用了。另外，有YNB何葡萄糖的培养基要用115度灭菌20Min,不用单独配。

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11楼2011-09-05 21:44:11

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香蕉宝宝

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你的MD只加了YNB和葡萄糖吗？没有添加硫酸铵或者其他氨基酸？
YNB是怎么灭菌的？谢谢！

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低调做人，你会一次比一次稳健；高调做事，你会一次比一次优秀

12楼2011-12-05 14:11:38

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2585165

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12楼: Originally posted by 香蕉宝宝 at 2011-12-05 14:11:38:
你的MD只加了YNB和葡萄糖吗？没有添加硫酸铵或者其他氨基酸？
YNB是怎么灭菌的？谢谢！

YNB过滤除菌的。

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475502411

哎呀呀，别老说我丑，比起小时候，我这还真算是漂亮了！

13楼2011-12-09 11:08:59

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475502411

铜虫 (著名写手)

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1511240楼: Originally posted by 2585165 at 2011-12-09 11:08:59
YNB过滤除菌的。...

你好，我是刚开始做酵母，现在还是白纸一张，想请教一下YNB.生物素5%的甲醇不能高压，如果过滤的话要无菌操作吗？谢谢

可以朝九晚五，也能浪迹天涯

14楼2012-09-05 17:21:31

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