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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母转化表达
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兔兔yy070330

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+3): 鼓励新虫参与交流！ 2011-09-05 22:13:46
引用回帖:
1楼: Originally posted by 2585165 at 2011-05-12 10:09:31:
周围做毕赤酵母的人不是很多，所以积攒了挺多问题的，希望大家能帮帮忙。
  1，毕赤酵母转化后在MD板子上，长几天后竟然变色了，差不多算是红色吧，是不是死掉了呢？
  2，同样的条件，除了质粒不相同外，上周转 ...

我做电转后也出现过红色的菌落，这个应该是染菌没错啦。至于感受态的制作，我是电转的，用YPD摇菌至OD600=1.3-1.5，然后离心，用预冷的无菌水重悬菌体（2次），离心然后拿1M的预冷山梨醇洗一次，最后用1Ml山梨醇重悬，分装后就可以用了。另外，有YNB何葡萄糖的培养基要用115度灭菌20Min,不用单独配。
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11楼2011-09-05 21:44:11
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香蕉宝宝

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你的MD只加了YNB和葡萄糖吗？没有添加硫酸铵或者其他氨基酸？
YNB是怎么灭菌的？谢谢！
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低调做人，你会一次比一次稳健；高调做事，你会一次比一次优秀
12楼2011-12-05 14:11:38
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2585165

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 香蕉宝宝 at 2011-12-05 14:11:38:
你的MD只加了YNB和葡萄糖吗？没有添加硫酸铵或者其他氨基酸？
YNB是怎么灭菌的？谢谢！

YNB过滤除菌的。
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475502411
哎呀呀，别老说我丑，比起小时候，我这还真算是漂亮了！
13楼2011-12-09 11:08:59
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475502411

铜虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
引用回帖:
1511240楼: Originally posted by 2585165 at 2011-12-09 11:08:59
YNB过滤除菌的。...

你好，我是刚开始做酵母，现在还是白纸一张，想请教一下YNB.生物素5%的甲醇不能高压，如果过滤的话要无菌操作吗？谢谢
赞一下 回复此楼
可以朝九晚五，也能浪迹天涯
14楼2012-09-05 17:21:31
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