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金虫 (正式写手)

[交流] 毕赤酵母转化表达 已有7人参与

周围做毕赤酵母的人不是很多,所以积攒了挺多问题的,希望大家能帮帮忙。
  1,毕赤酵母转化后在MD板子上,长几天后竟然变色了,差不多算是红色吧,是不是死掉了呢?
  2,同样的条件,除了质粒不相同外,上周转化的效果很好,而这周就只有小小的菌苔,长着长着也都死掉了。纠结中。
  3,关于毕赤酵母感受态的制作,1M DTT大家是用水还是缓冲液配制的?而两种不同的配制方法,对于感受态的转化效率是否有影响?
  现就这么多问题,希望大家能帮忙看看。
  大家有什么问题也都可以提一下,要是能帮上的一定竭尽全力。
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哎呀呀,别老说我丑,比起小时候,我这还真算是漂亮了!
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金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by liby at 2011-05-12 12:56:16:
红色的是染菌了。主要是试剂,如:山梨醇。

感受态是同一批的,整板子都是先是白色,长一长就不长了,然后变色了,估计是挂了。
哎呀呀,别老说我丑,比起小时候,我这还真算是漂亮了!
4楼2011-05-12 13:45:21
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金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by roomofxw at 2011-05-12 13:01:42:
有一种红酵母,是红色的。
用过GS115印象是白色的,所以可能是染菌了。
做的电转,感受态用山梨醇洗的,印象中没用DTT,反正也转出来了。

染菌的可能性不大,因为整个板子长的很均匀。
哎呀呀,别老说我丑,比起小时候,我这还真算是漂亮了!
5楼2011-05-12 13:46:09
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金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by huaren125 at 2011-07-17 16:22:08:
电击转化用的是山梨醇,我的也是有一次都是红的菌落,现在又出现黄的菌落,不知道是什么东东啦?

红的菌落应该是染菌了,黄的是因为死掉了。
哎呀呀,别老说我丑,比起小时候,我这还真算是漂亮了!
8楼2011-07-17 23:12:46
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金虫 (正式写手)

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励回帖热心交流 2011-07-20 00:03:27
引用回帖:
Originally posted by huaren125 at 2011-07-18 19:48:24:
我的MD培养基成分都灭菌啦(YNB,G),是不是灭菌后效果不好啊?

这个就不知道了,但是YNB不是都是过滤除菌的么?
还有菌死掉的原因很多,不是只有培养基的问题。
也有可能是感受态以及转化的问题。
哎呀呀,别老说我丑,比起小时候,我这还真算是漂亮了!
10楼2011-07-19 23:26:07
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金虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 香蕉宝宝 at 2011-12-05 14:11:38:
你的MD只加了YNB和葡萄糖吗?没有添加硫酸铵或者其他氨基酸?
YNB是怎么灭菌的?谢谢!

YNB过滤除菌的。

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哎呀呀,别老说我丑,比起小时候,我这还真算是漂亮了!
13楼2011-12-09 11:08:59
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