| 查看: 1980 | 回复: 5 | |||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
SDS-PAGE电泳，菌液总蛋白，染色后显示的是弥散的
|
|||
|
用的菌液总单蛋白，考马斯亮蓝人染色几乎没有条带，所以就用了硝酸银染色，结果根本不成条带，完全是成弥散状的，整个泳道都是黑的，同时跑的Marker很正常，考马斯亮蓝染色的条带清晰。 我用这个总蛋白过完DEAE柱子后，因为蛋白含量很低，所以只能用硝酸银染色，染色后的条带还是比较清晰的 请教高人啊，实验没办法继续了！！ 补充：样品加入上样缓冲液后不是呈蓝色的而是黄色的。 [ Last edited by 五木凋零 on 2011-5-9 at 17:04 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
三甲基碘化亚砜的氧化反应
已经有4人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有5人回复
-
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有12人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有3人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
-
AI论文写作工具：是科研加速器还是学术作弊器？
已经有3人回复
-
论文投稿，期刊推荐
已经有4人回复
-
硕士和导师闹得不愉快
已经有13人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
SDS-PAGE 电泳蛋白分子量飘移
已经有12人回复- 请教为啥SDS-PAGE电泳条带弥散？
已经有10人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳
已经有24人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳
已经有23人回复
- 原核表达菌液裂解
已经有14人回复
- 细菌总蛋白SDS-PAGE时菌体处理出现粘稠物？？
已经有6人回复
- 求助！关于SDS-PAGE 不同蛋白电泳的
已经有3人回复
- Tricine-SDS-PAGE电泳问题求助。急！！！
已经有12人回复
- SDS-PAGE电泳蛋白质变性
已经有7人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳条带问题
已经有7人回复
- 【求助】急！有木有做过Tricine－SDS－PAGE小分子蛋白电泳的进！
已经有32人回复
- 【求助】SDS-PAGE电泳上样量
已经有6人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE电泳问题
已经有38人回复
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- MicEPI: 15
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
rainwander(EPI+1): 2011-05-09 21:57:28
rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-05-09 21:57:35
rainwander(EPI+1): 2011-05-09 21:57:28
rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-05-09 21:57:35
|
【补充：样品加入上样缓冲液后不是呈蓝色的而是黄色的。】 这说明，你的样品根本就是呈酸性的。要加大电泳Buffer用量使之呈碱性蓝色。或者用 1M Tris Base加 几uL 到样品里调高pH 很可能是电泳都没有走进胶里面，因而考染没有颜色。蛋白太少了！ 银染怎样都会染色的，关键是时间长短，长时间整个胶都发黑。即使没有蛋白！ 而同时跑的marker 考染 正常，说明不是染色的问题。 最可能的解释：你的泳道里没有跑进蛋白。 |
3楼2011-05-09 18:49:46
hqchlorella
铜虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 240.2
- 帖子: 71
- 在线: 55.8小时
- 虫号: 1253398
- 注册: 2011-04-02
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
2楼2011-05-09 17:13:36
4楼2011-05-09 21:15:51
5楼2011-05-10 12:47:08