24小时热门版块排行榜    

查看: 1881  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

worm2010

金虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母转化后的鉴定

我用的是pGAPZαA质粒转化毕赤后,抗生素筛选平板长出单菌落了,我下一步想摇瓶培养收集菌体裂解后PCR鉴定并测序。我用的是pGAPZαA质粒转化毕赤后,抗生素筛选平板长出单菌落了,我下一步想摇瓶培养收集菌体裂解后PCR鉴定并测序。
但是摇瓶时有个问题,就是加不加抗生素呢?师兄说要加,但是我发现加完抗生素摇瓶里的菌长得好慢啊!!!难道是没长吗?是不是加了抗生素的液体YPD菌体生长比较慢啊?我的菌是X33野生型的,请大家支招
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小石头IX

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by qiuqiushine at 2013-12-16 16:25:25
你好,我也是像你说的这样做的菌落PCR,可是我扩增不出目的条带,请问这是为什么呢?转化后的菌落在MD MM G418上都可以长...

是不是需要破除细胞壁
7楼2018-12-26 13:31:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

hh981236

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
worm2010(金币+3): 2011-05-07 19:29:03
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-05-07 21:16:03
毕赤酵母的外源基因会整合到染色体上,遗传比较稳定,培养时可以不加抗生素,最多每隔一段时间用抗生素平板筛选一下就可以了。PCR鉴定不用摇瓶发酵,直接把平板上的单克隆挑到PCR反应体系中即可,并把PCR的第一步预变性时间时间设置为3-4min。
2楼2011-05-07 09:49:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

worm2010

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by hh981236 at 2011-05-07 09:49:06:
毕赤酵母的外源基因会整合到染色体上,遗传比较稳定,培养时可以不加抗生素,最多每隔一段时间用抗生素平板筛选一下就可以了。PCR鉴定不用摇瓶发酵,直接把平板上的单克隆挑到PCR反应体系中即可,并把PCR的第一步 ...

感谢!
3楼2011-05-07 19:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiuqiushine

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hh981236 at 2011-05-07 09:49:06
毕赤酵母的外源基因会整合到染色体上,遗传比较稳定,培养时可以不加抗生素,最多每隔一段时间用抗生素平板筛选一下就可以了。PCR鉴定不用摇瓶发酵,直接把平板上的单克隆挑到PCR反应体系中即可,并把PCR的第一步预 ...

你好,我也是像你说的这样做的菌落PCR,可是我扩增不出目的条带,请问这是为什么呢?转化后的菌落在MD MM G418上都可以长
4楼2013-12-16 16:25:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 材料专业求调剂 +6 hanamiko 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 350求调剂 +5 weudhdk 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:04 by luoyongfeng
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +3  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 4/200 2026-03-20 21:01 by zhukairuo
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见