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sxxuan

金虫 (著名写手)

[求助] PCR是阳性但酶切是阴性,怎么回事?

最近做一个菌液,是已经带有重组质粒的。这个经过PCR鉴定是阳性的,用PCR做杂交也没有问题,信号很强。
但是以这管菌放大摇菌后提取质粒,以质粒为模板的PCR产物来做杂交,信号就很弱甚至没有了。
于是重新划板摇菌提质粒,甚至重新做了克隆,以菌液或质粒为模板,PCR都能得到很亮的条带,但是酶切或杂交就是没有信号
请大家帮忙分析一下看看是怎么回事?杂交的实验我没涉及过啊,谢谢了谢谢了~
ps:可以肯定的是探针是没有问题的
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dhd997

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【答案】应助回帖

sxxuan(金币+1): 2011-04-25 13:39:47
参考参考,参考,要理解参考的含义哦
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
9楼2011-04-23 13:20:19
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