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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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piggpi

金虫 (小有名气)

[求助] 大家帮忙分析一下PCR电泳图

提鳗鱼总RNA后直接RT,接下来的PCR电泳结果如图。
我要的条带在330bp。可基本是非特异性条带。
我做的是小清蛋白克隆,以前克隆其他鱼的时候也是用同样的引物,以前没这种情况出现,有没有可能是引物降解了?
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在很久很久以前
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piggpi

金虫 (小有名气)

如图:
第一泳道是50bp的M,第4道是不加模板空对照,第5道所用引物为重新稀释的
第4道也有多条条带,那就是说引物肯定污染了。是这样吗?
还有学姐的意思是说后面四道上面的亮带是一样的,是染料对迁移率有影响。
那染料的影响不应该是一样的吗?为什么条带的位置会不一样?

在很久很久以前
8楼2011-04-21 12:27:47
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): good 2011-04-20 17:16:36
piggpi(金币+2): 感谢参与!!! 2011-04-21 10:22:01
你把引物做个空对照试试,就是不加模板,另外把退火温度提高点再扩增试试
在等待中涅槃重生
2楼2011-04-20 16:20:52
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
Originally posted by piggpi at 2011-04-20 16:18:10:
提鳗鱼总RNA后直接RT,接下来的PCR电泳结果如图。
我要的条带在330bp。可基本是非特异性条带。
我做的是小清蛋白克隆,以前克隆其他鱼的时候也是用同样的引物,以前没这种情况出现,有没有可能是引物 ...

看不到图片……不知道是不是我的问题……
3楼2011-04-20 17:17:16
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piggpi

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yuxia82012 at 2011-04-20 16:20:52:
你把引物做个空对照试试,就是不加模板,另外把退火温度提高点再扩增试试

我去试试。。。。
在很久很久以前
4楼2011-04-20 18:40:35
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