24小时热门版块排行榜    

查看: 705  |  回复: 2
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看

321wangke321

金虫 (正式写手)


[交流] 10ul定量体系

求SYBR定量10ul体系的具体配置,谢谢了,实验室都是25ul的?可不可以直接根据25ul体系按比例来配置?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
321wangke321(金币+5): 2011-04-23 20:11:09
5ul SYBG MIX
PRIMERs:F/R:0.5ul
cDNA(5ug反转的话)0.2ul
ddH2O:3.8ul
2楼2011-04-22 22:38:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+5, EPI+1): 支持原创。 2011-04-23 18:02:25
引用回帖:
Originally posted by 321wangke321 at 2011-04-19 15:41:51:
求SYBR定量10ul体系的具体配置,谢谢了,实验室都是25ul的?可不可以直接根据25ul体系按比例来配置?

可以的,很多实验室为了省成本都这么做。试剂厂商出于盈利目的,一般会建议20ul或25ul的体系,实际上10ul体系也能做的。我用Takara的是这么做的:

SYBR Premix Ex Taq(2X,+ROX)    5 μL
Forward Primer (2 μM)                  1 μL
Reverse Primer (2 μM)                  1 μL
cDNA Template                     (<500 ng)         
H2O                                       to 10 μL

cDNA作模板的话,其量小于对应500ng的RNA。引物稀释成2 μM是为了加样方便,太浓的引物要小体积,不好加。

这体系我用很久了,没问题!

[ Last edited by 西瓜 on 2011-4-23 at 15:36 ]
3楼2011-04-23 15:34:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 321wangke321 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见