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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有人用过ROX染料吗？
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hdzjy2005

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有人用过ROX染料吗？ 已有4人参与

我在做RT-PCR,不是用的试剂盒，现在想自己加ROX来校正误差，请问有人知道在哪能买到ROX吗？
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1楼 2010-06-23 15:48:17
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-06-23 17:11:29
hdzjy2005(金币+15): 2010-06-23 18:11:29
有些机器需要ROX有些不需要……ABI的机器有时候就需要
ROX似乎Invitrogen有单独卖的
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2楼2010-06-23 15:57:50
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
太多了，基本上做定量试剂盒的公司都卖
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3楼2010-06-23 16:00:43
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hdzjy2005

金虫 (小有名气)

继续求教，呵呵

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-06-23 15:57:50:
有些机器需要ROX有些不需要……ABI的机器有时候就需要
ROX似乎Invitrogen有单独卖的

我用的是ABI的7300，孔间的信号差别很大，影响了CT值的测定，现在感觉需要ROX校正。还有，ABI RT-PCR不用阳性参比，这样提供的数据是不是不可信？
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4楼2010-06-23 16:18:47
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-23 16:28:23
引用回帖:
Originally posted by hdzjy2005 at 2010-06-23 16:18:47:

我用的是ABI的7300，孔间的信号差别很大，影响了CT值的测定，现在感觉需要ROX校正。还有，ABI RT-PCR不用阳性参比，这样提供的数据是不是不可信？

孔间Ct值差异大，首先要考虑的是自己的实验手法的问题
我用10ul体系做，3个复孔Ct值波动不会超过1，一般都在0.1~0.5之间
关键就是上样的时候多吹打几下，保证体系均匀，同时枪头一定要用进口的（Axygen），吸附性小，每次取样的均一性强
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5楼2010-06-23 16:22:46
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
阳性参比？你指的是……
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6楼2010-06-23 16:23:45
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hdzjy2005

金虫 (小有名气)

passive referense

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-06-23 16:23:45:
阳性参比？你指的是……

passive referense，这怎么翻译？passive referense里有一种是ROX
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7楼2010-06-23 16:33:06
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hdzjy2005

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-06-23 16:22:46:


孔间Ct值差异大，首先要考虑的是自己的实验手法的问题
我用10ul体系做，3个复孔Ct值波动不会超过1，一般都在0.1~0.5之间
关键就是上样的时候多吹打几下，保证体系均匀，同时枪头一定要用进口的（Axygen）， ...

我们这台7300从A排到H排信号呈降低趋势，不光我的实验结果这样。再有，我觉得我的体系混匀了，而且也是Axygen的枪头。
曾经用ABI的试剂盒做过，TaqMan探针的，那时信号也很重现，觉得那是参比校正的结果。
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8楼2010-06-23 16:42:43
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hdzjy2005

金虫 (小有名气)

reference

引用回帖:
Originally posted by hdzjy2005 at 2010-06-23 16:33:06:

passive referense，这怎么翻译？passive referense里有一种是ROX

我拼错了
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9楼2010-06-23 16:56:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
如果是机器本身的问题，那么加ROX还是必要的
当然了，要找工程师回来弄
qPCR仪的均一性应该要很好才行
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10楼2010-06-23 17:57:32
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