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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】构建质粒问题
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380218013

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】构建质粒问题 已有8人参与

小弟构质粒时，涂布AMP平板有菌落，摇菌10H后菌液PCR有目的，但是小抽的时候发现沉淀的菌很少，所以小抽的浓度很低。 很困惑 不知道原因。请大虾指教。
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1楼 2011-04-14 19:03:23
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): good 2011-04-19 19:01:19
应该是低拷贝的质粒，建议你在正常摇菌10h后再添加阿拉伯糖或者氯霉素都可以一定程度的提高质粒的拷贝，不过使用浓度我忘了，你再查一查吧
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
6楼2011-04-19 09:00:37
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新人小玥

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
载体可能是低拷贝吧，这样长的比较慢
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2楼2011-04-16 22:58:48
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): good 2011-04-19 08:26:28
建议楼主摇菌时间延长，我们用的Pet28a和MBP有时也遇到这样的问题，就过夜摇菌。
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jiayoubashaonian
3楼2011-04-17 15:33:25
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
传说适当提高抗生素水平，延长培养时间可以增加拷贝
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4楼2011-04-17 19:05:39
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