应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】酶提取液的问题
51/1返回列表
查看: 1715  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

阿叉

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】酶提取液的问题

以下是我的操作步骤：
      取藻液3ml，4℃、10 000 r/min冷冻离心10min，弃上清液，称量其质量，加4.0ml磷酸缓冲溶液（0.05mol/L，PH7.0）在冰浴下超声破碎（400w，超声10s间隔10s,操作10分钟)接着在4℃下以8000 r/min冷冻离心20分钟，此上清液为酶提取。

   然后用该酶提取液去做POD酶活性实验，可是一点反应也没有，没任何颜色变化啊，  求高手指导 我错在哪了，是酶提取液的问题？

我用冰浴研磨的，可是一点酶活性也测不出来 ，我用冰浴超声波破碎的，也没有一点酶活性，但是研磨的也测不出蛋白质，超声的可以测出蛋白质，请问大侠这是什么情况了，会不是藻太少的缘故？

还有就是测蛋白质的酶粗液研磨的时候 温度对蛋白质的影响大吗？研磨用的磷酸缓冲液PH 对蛋白质的影响大吗

还有就是高速离心怎么有时离心效果好，有时离心效果不好，高速离心机是好的啊

[ Last edited by 阿叉 on 2011-4-14 at 19:38 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-04-13 21:28:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fangxi010

禁虫 (小有名气)
★ ★
阿叉(金币+1):谢谢参与
jhu132llh(金币+1): 活跃 2011-05-19 08:44:33
本帖内容被屏蔽
4楼2011-05-18 15:48:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

kobe8md1

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★
阿叉(金币+1):谢谢参与
咸鱼(金币+2): 谢谢回帖~ 2011-04-15 14:16:12
你第一步离心后  海藻的沉淀有多少？  是不是太少了   加2ml磷缓试试   或者在显色时多加酶液   再看看你是药品有没有问题
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-04-15 12:35:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿叉

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by kobe8md1 at 2011-04-15 12:35:37:
你第一步离心后  海藻的沉淀有多少？  是不是太少了   加2ml磷缓试试   或者在显色时多加酶液   再看看你是药品有没有问题

药品应该没有问题，我今天摘了路上几个树叶，用研磨能测出POD来，
同样树叶，研磨后再超声破碎却不能测出POD 来，很费解啊

对于我要做的藻，是斜生栅藻，不论是研磨还是超声破碎还是研磨加超声破碎都不能测出POD来，

大侠我该怎么办，是量太少了吗？如果是的话，差不多要多少，您能给个让我有数的量吗（其实我感觉不是量的问题，因为感觉哪怕一点点也能有一点点颜色变化啊 ）
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-15 20:38:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

6041

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
阿叉(金币+1): 谢谢参与
jhu132llh: 金币+2, 鼓励积极交流 2012-04-16 21:21:04
温度对酶活性有影响……超声产热大，有可能让酶失活，但是你研磨测不出活性，超声却测出了活性，这个很诡异……不知道楼主找到原因了吗？
赞一下 回复此楼
5楼2012-04-15 15:26:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123！
[考研] 293求调剂 +12 zjl的号 2026-03-16 17/850 2026-03-22 16:51 by i_cooler
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +4 某某某某位 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:30 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 346求调剂[0856] +4 WayneLim327 2026-03-16 7/350 2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭