24小时热门版块排行榜    

查看: 1912  |  回复: 8

谢开龙

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】关于菌体收集的问题

小弟最近在做BT菌基因的筛选,利用水煮的办法粗提DNA,但是发现水煮后一部分菌株离心不下去,特请教一下原因?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢开龙(金币+1):谢谢参与
抢个沙发,等高人出现
2楼2011-04-11 22:16:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢开龙(金币+1):谢谢参与
为什么煮沸?
3楼2011-04-11 22:23:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢开龙(金币+1):谢谢参与
以前提过,70-80度之间的,现在都忘记了
4楼2011-04-12 20:02:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)


★ ★
谢开龙(金币+1):谢谢参与
wolfebst(金币+1): 感谢回答 2011-04-14 16:41:55
你说的菌株长得什么样子?什么颜色?你的转速多高?个人认为你的离心力不够大,煮沸后的变性蛋白没有被离下去。
5楼2011-04-12 21:59:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢开龙

金虫 (小有名气)


哦,我没说清楚,这个办法适用于提取质粒DNA,煮沸可以破解细胞壁,并使蛋白和核DNA变性,而质粒DNA因为其互相缠绕的拓扑结构而不会变性。
6楼2011-04-13 20:05:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zemin_fang

木虫 (正式写手)



谢开龙(金币+1):谢谢参与
为什么要煮沸?SDS裂解法不是很好吗?
7楼2011-04-13 20:55:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asd564244481

铜虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 谢开龙 at 2011-04-11 21:39:26:
小弟最近在做BT菌基因的筛选,利用水煮的办法粗提DNA,但是发现水煮后一部分菌株离心不下去,特请教一下原因?

我不知道你这个问题是不是偶然的,我之前用冻融法破碎细胞就遇到了这种问题,我先冷冻然后用沸水加热破碎细胞,结果在离心的时候,离心管中的菌体就分为上下两层,在离心管中的液面上方也有一层菌体没有被离心到离心管的底部。求牛人解答。
8楼2011-04-15 08:55:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松虱

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果对后续的实验没有影响就没事了撒 但是如果影响很大的话 就建议还是用试剂盒 或者配置溶剂进行提取
9楼2011-04-15 11:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 谢开龙 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +6 myrtle 2026-08-26 9/450 2026-09-02 20:03 by 大飞鱼鱼鱼
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +14 Kittylucky 2026-08-27 15/750 2026-09-02 19:35 by liumei0601
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
请填处理意见