应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】烟曲霉菌提取RNA
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1843  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

li1977li

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】烟曲霉菌提取RNA 已有3人参与

想从烟曲霉中提RNA进行反转录，所在实验室由于缺乏液氮研磨条件，用的是上海生工的trizol试剂，取约100mg菌体加1ml trizol，用的塑料研磨小棒在冰上磨约10分钟成匀浆状再按操作加氯仿等，提了2次在管底均见白色沉淀，浓度为200 ug/ml 左右,260/280为1.9 ，但1%琼脂糖电泳120V，20min均未看到条带，请教大家是怎回事？另在无液氮研磨下如何破壁？液体摇菌在多长时间收集菌体？在此先谢了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-04-10 20:46:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by li1977li at 2011-04-11 09:32:00:
拖尾的带是好像看到但无法确定是否是所提的RNA降解啊，按照你指导的方法去做看看，有问题还得请教啊！

呵呵，客气了！RNA被降解，各种大小都有，所以有拖尾。下次上图来啊，这样更直观。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-04-11 09:43:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
OD值测得浓度挺高的了，跑胶看不到条带十有八九是跑胶过程中降解了。
可以把电泳槽的缓冲液倒掉，换成新的，再跑一次看看。200ug/ml的浓度，上样1ul足矣。跑5分钟就可以看结果了。需要的话再跑个5分钟就差不多了。
破壁的话，我们实验室用的是破碎仪，10多秒就可以搞定。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-04-10 22:01:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li1977li

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-10 22:01:27:
OD值测得浓度挺高的了，跑胶看不到条带十有八九是跑胶过程中降解了。
可以把电泳槽的缓冲液倒掉，换成新的，再跑一次看看。200ug/ml的浓度，上样1ul足矣。跑5分钟就可以看结果了。需要的话再跑个5分钟就差不多了 ...

谢谢指导，我都上样101ul，电泳液是新的但电泳槽没经处理是跑DNA的，不知有多大影响。
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-11 08:49:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by li1977li at 2011-04-11 08:49:43:
谢谢指导，我都上样101ul，电泳液是新的但电泳槽没经处理是跑DNA的，不知有多大影响。

我以前有一次也用的DNA的槽，没跑出来，后来用新的电泳液洗了一次，再跑就看到了。有条件的话跑RNA的电泳槽最好专用。
先确定有没有RNA吧，跑个5分钟就看看，你上10ul都有2ug了，这么大的量，如果有的话，就算被降解也该看到拖尾的带的。

提RNA时，异丙醇沉淀之后看到白色沉淀，我个人认为肯定是提出来了的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-04-11 09:11:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +12 Y-cap 2026-03-29 15/750 2026-03-31 09:25 by Huaxue_Wang
[考研] 一志愿西交288化工专硕求调剂 +4 好运好运接接 2026-03-24 4/200 2026-03-31 09:18 by 西京学院土木工�
[考研] 308求调剂 +8 墨墨漠 2026-03-25 8/400 2026-03-31 09:15 by dgd2013
[考研] 085601一志愿中山大学深圳材料工程330求调剂 +5 pipiver 2026-03-30 5/250 2026-03-31 07:37 by JourneyLucky
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分 +10 dongfang59 2026-03-27 10/500 2026-03-30 23:42 by 果果妈咪
[考研] 288资源与环境专硕求调剂，不限专业，有学上就行 +11 lllllos 2026-03-30 11/550 2026-03-30 21:19 by 研究僧导导
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +11 麻辣鱿鱼 2026-03-27 12/600 2026-03-30 19:33 by Wang200018
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +18 Mr. Z 2026-03-25 19/950 2026-03-30 19:01 by Wang200018
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +5 min3 2026-03-24 6/300 2026-03-30 18:42 by 544594351
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-24 6/300 2026-03-29 20:45 by 无际的草原
[考研] 299求调剂 +10 15188958825 2026-03-25 10/500 2026-03-29 17:51 by 王亮_大连医科大
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 一志愿华理，数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 12/600 2026-03-28 18:15 by AZMK
[考研] 394求调剂 +3 好事多磨静候佳� 2026-03-26 5/250 2026-03-28 14:24 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 0703化学338求调剂！ +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭