应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】烟曲霉菌提取RNA
51/1返回列表
查看: 1818  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

li1977li

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】烟曲霉菌提取RNA 已有3人参与

想从烟曲霉中提RNA进行反转录，所在实验室由于缺乏液氮研磨条件，用的是上海生工的trizol试剂，取约100mg菌体加1ml trizol，用的塑料研磨小棒在冰上磨约10分钟成匀浆状再按操作加氯仿等，提了2次在管底均见白色沉淀，浓度为200 ug/ml 左右,260/280为1.9 ，但1%琼脂糖电泳120V，20min均未看到条带，请教大家是怎回事？另在无液氮研磨下如何破壁？液体摇菌在多长时间收集菌体？在此先谢了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-04-10 20:46:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li1977li

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-11 09:11:59:
我以前有一次也用的DNA的槽，没跑出来，后来用新的电泳液洗了一次，再跑就看到了。有条件的话跑RNA的电泳槽最好专用。
先确定有没有RNA吧，跑个5分钟就看看，你上10ul都有2ug了，这么大的量，如果有的话，就 ...

拖尾的带是好像看到但无法确定是否是所提的RNA降解啊，按照你指导的方法去做看看，有问题还得请教啊！
赞一下 回复此楼
5楼2011-04-11 09:32:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
OD值测得浓度挺高的了，跑胶看不到条带十有八九是跑胶过程中降解了。
可以把电泳槽的缓冲液倒掉，换成新的，再跑一次看看。200ug/ml的浓度，上样1ul足矣。跑5分钟就可以看结果了。需要的话再跑个5分钟就差不多了。
破壁的话，我们实验室用的是破碎仪，10多秒就可以搞定。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-04-10 22:01:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li1977li

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-10 22:01:27:
OD值测得浓度挺高的了，跑胶看不到条带十有八九是跑胶过程中降解了。
可以把电泳槽的缓冲液倒掉，换成新的，再跑一次看看。200ug/ml的浓度，上样1ul足矣。跑5分钟就可以看结果了。需要的话再跑个5分钟就差不多了 ...

谢谢指导，我都上样101ul，电泳液是新的但电泳槽没经处理是跑DNA的，不知有多大影响。
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-11 08:49:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by li1977li at 2011-04-11 08:49:43:
谢谢指导，我都上样101ul，电泳液是新的但电泳槽没经处理是跑DNA的，不知有多大影响。

我以前有一次也用的DNA的槽，没跑出来，后来用新的电泳液洗了一次，再跑就看到了。有条件的话跑RNA的电泳槽最好专用。
先确定有没有RNA吧，跑个5分钟就看看，你上10ul都有2ug了，这么大的量，如果有的话，就算被降解也该看到拖尾的带的。

提RNA时，异丙醇沉淀之后看到白色沉淀，我个人认为肯定是提出来了的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-04-11 09:11:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科郑州大学物理学院，一志愿华科070200学硕，346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +4 脱颖而出 2026-03-16 11/550 2026-03-19 08:11 by 脱颖而出
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 321求调剂 +3 何润采123 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:27 by li123456789.
[考研] 274求调剂 +5 S.H1 2026-03-18 5/250 2026-03-18 21:27 by guosr9609
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-16 10/500 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸！ 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 0703化学336分求调剂 +6 zbzihdhd 2026-03-15 7/350 2026-03-18 09:53 by zhukairuo
[考研] 一志愿，福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 土木第一志愿276求调剂，科研和技能十分丰富，求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭