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original900木虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】部分酶切的电泳图不知为何成这个样子？有经验的虫虫们帮忙解释一下吧！ 已有6人参与
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大家好！我做部分酶切后跑胶准备切胶，可是电泳图不知为何成为这个样子？很疑惑，不知该如何解决？请有经验的虫虫们帮忙解决一下，谢谢了！ 现把我试验的大致情况介绍如下： 我将genomic DNA做Sau3AI的部分酶切预实验（50uL反应体系中，10 X H buffer 5 uL，Sau3AI 0.5 U，genomic DNA 44.5uL），按照5，10，15，20，25，30min分别反应后，跑胶确定最佳酶切条件，电泳图见图1. 图一中第一排第一个孔是DNA+buffer，第二至第五个孔分别是反应5，10，15，20min的酶切效果，第二排中间三个分别是反应25，30，35min的酶切效果。由于上样量很小所以条带不是很亮！但根据图我确定最佳酶切条件是20min。 然后根据确定的最佳酶切条件进行大量酶切，酶切完成后跑胶，准备切胶回收，可是跑胶结果吓我一跳！泳道两周都是大量亮亮的一团物质，不知是什么？因为我在上样的时候也没有见到任何异常，样品没有漂，也没有溢出来，所以出现这样的结果不知道是什么原因？我又重新重新酶切，点样，跑胶，结果还是这样，所以不知道问题出在哪里？恳请各位指点，谢谢。大量酶切的电泳图见图2. 备注：由于我要的是2kb以上的片段，所以电泳的时候RNA没有除，图片比较难看，影响整体效果，各位请仔细看啦，不好意思！   |
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