| 查看: 3481 | 回复: 10 | |||
original900木虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】部分酶切的电泳图不知为何成这个样子？有经验的虫虫们帮忙解释一下吧！ 已有6人参与
|
|
大家好！我做部分酶切后跑胶准备切胶，可是电泳图不知为何成为这个样子？很疑惑，不知该如何解决？请有经验的虫虫们帮忙解决一下，谢谢了！ 现把我试验的大致情况介绍如下： 我将genomic DNA做Sau3AI的部分酶切预实验（50uL反应体系中，10 X H buffer 5 uL，Sau3AI 0.5 U，genomic DNA 44.5uL），按照5，10，15，20，25，30min分别反应后，跑胶确定最佳酶切条件，电泳图见图1. 图一中第一排第一个孔是DNA+buffer，第二至第五个孔分别是反应5，10，15，20min的酶切效果，第二排中间三个分别是反应25，30，35min的酶切效果。由于上样量很小所以条带不是很亮！但根据图我确定最佳酶切条件是20min。 然后根据确定的最佳酶切条件进行大量酶切，酶切完成后跑胶，准备切胶回收，可是跑胶结果吓我一跳！泳道两周都是大量亮亮的一团物质，不知是什么？因为我在上样的时候也没有见到任何异常，样品没有漂，也没有溢出来，所以出现这样的结果不知道是什么原因？我又重新重新酶切，点样，跑胶，结果还是这样，所以不知道问题出在哪里？恳请各位指点，谢谢。大量酶切的电泳图见图2. 备注：由于我要的是2kb以上的片段，所以电泳的时候RNA没有除，图片比较难看，影响整体效果，各位请仔细看啦，不好意思！   |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有22人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有7人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有14人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有11人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有10人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有12人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有11人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？
已经有10人回复
- 环形质粒酶切电泳图分析求解
已经有25人回复
- Bio-rad蛋白电泳的问题请教，有图，希望有经验者多多指教！
已经有27人回复
- 我做酶切电泳自制marker开始都挺好，后来跑不开了。
已经有7人回复
- 我酶切质粒后，电泳显示没有切开，是不是因为酶在外面放的时间长了？
已经有9人回复
- 大家帮忙看一下，好奇怪，我的电泳图，三个加样孔在分离胶合在一起了
已经有7人回复
- 质粒是否需要酶切后再电泳？
已经有9人回复
- 【求助/交流】质粒DNA可以不通过酶切直接跑电泳检测吗？
已经有24人回复
- 哪位高手帮我看看我的DNA电泳图
已经有13人回复
- 【求助/交流】PCR引物设计出来了，但酶切之后电泳没条带啊
已经有18人回复
brightfuture01
木虫之王 (文坛精英)
我爱打老虎
- MicEPI: 14
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 1.2
- 金币: 113422
- 散金: 1526
- 红花: 224
- 沙发: 1
- 帖子: 28967
- 在线: 3731.7小时
- 虫号: 464575
- 注册: 2007-11-21
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
2楼2011-04-07 19:30:35
jingcao3081
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 14477.1
- 散金: 144
- 红花: 9
- 沙发: 3
- 帖子: 3157
- 在线: 115.2小时
- 虫号: 592055
- 注册: 2008-09-03
- 性别: GG
- 专业: 森林健康
3楼2011-04-07 19:31:29
original900
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3257.3
- 散金: 13
- 帖子: 244
- 在线: 63.2小时
- 虫号: 321821
- 注册: 2007-03-11
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2011-04-07 20:58:07
original900
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3257.3
- 散金: 13
- 帖子: 244
- 在线: 63.2小时
- 虫号: 321821
- 注册: 2007-03-11
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2011-04-07 21:00:26
brightfuture01
木虫之王 (文坛精英)
我爱打老虎
- MicEPI: 14
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 1.2
- 金币: 113422
- 散金: 1526
- 红花: 224
- 沙发: 1
- 帖子: 28967
- 在线: 3731.7小时
- 虫号: 464575
- 注册: 2007-11-21
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
6楼2011-04-07 21:17:30
original900
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3257.3
- 散金: 13
- 帖子: 244
- 在线: 63.2小时
- 虫号: 321821
- 注册: 2007-03-11
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2011-04-08 09:16:42
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励交流·~~ 2011-04-08 15:37:21
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励交流·~~ 2011-04-08 15:37:21
|
本帖内容被屏蔽 |
8楼2011-04-08 14:13:22
original900
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3257.3
- 散金: 13
- 帖子: 244
- 在线: 63.2小时
- 虫号: 321821
- 注册: 2007-03-11
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2011-04-09 22:04:19
| RNA |
10楼2012-03-17 12:22:41
