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【求助】流动相平衡问题
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最近太纠结了。 分析一个五肽样品，用50mM KH2PO4做的流动相，柱子用完后用甲醇保存的，但再次平衡柱子的时候总会出现保留时间提前的情况，提前多少不一定但重复性很好，如果我用水再冲冲，用纯有机相再冲冲，再回过来平衡，咦，保留时间又正常了（与最初，问题在哪里呢？有什么办法可以避免吗？ 注：初上流动相前有用不含盐的流动相平衡30分钟，甚至更长的1个小时，问题仍然存在。第二次上流动相前分别用不含盐的流动相、纯有机相、不含盐的流动相、流动相依次各平衡约20分钟，能解决问题。 已换过不下五台仪器（安捷伦和岛津都有），至少四根柱子了，相同的问题不断重复上演。但又不是每次都会。甚至有时候没平衡那么久也没问题，纯粹就是个概率问题了。 我想知道原因和预防，而不是如何解决，因为我有解决的办法，但是太耗时间，我等不起，要不然每天要加班，很凄惨的。 |
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