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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱柱平衡时间过长
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年年糕

铜虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱柱平衡时间过长

液相色谱柱平衡时间过长，差不多半天左右的时间才行，C18柱，换过好几个项目（不同流动相）平衡时间都很长，怀疑是仪器的问题，又找不到问题所在，求高手指点，用的是安捷伦1260（出口单向阀新换过），还有之前走样品时，中间会有一段基线下掉，过三分钟左右又归零，好奇怪
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1楼 2013-02-01 21:43:52
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wy1518

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~ 2013-02-02 19:20:00
换个柱子试试 没有问题的话，看是不是检测器的灯的问题，都没问题的话测试一下泵的流速看有没有问题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-02-02 07:47:21
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容月~

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~ 2013-02-02 19:19:51
把流动相混一起走呢  是不是比列阀的问题  流动相脱气 灯看能量是否还够   流动相里面是不是有离子对试剂等 等会是基线不平  换柱子试试
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有希望就会有奇迹
3楼2013-02-02 10:43:43
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heyo_123

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~ 2013-02-02 19:20:14
平衡时间长短和柱长、流动相也有关系…柱越长所需时间也越长…若是缓冲盐体系做流动相平衡时间会很长…泵的稳定性也很重要…建议分段验证…

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4楼2013-02-02 10:46:13
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66620002

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般情况下，导致基线时间过长有3点，第一点就是检测波长在低波长，220nm以下基本上平衡时间就要长一些，因为大多数检测物在此处有紫外吸收。第二点就是紫外灯的问题，紫外灯使用寿命快到了的时候也容易出现此类情况，也就是说紫外灯没有完全点亮。第三点就是管路污染，柱子或者你的管路不干净。可以拆开四元泵换白头滤芯。希望对您有帮助。如果需要更换配件的话，可以提供相应的配件报价。
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为天地立心，为生民立命，为往圣继绝学，为万世开太平！
9楼2013-02-03 10:56:44
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普通回帖

年年糕

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wy1518 at 2013-02-02 07:47:21
换个柱子试试 没有问题的话，看是不是检测器的灯的问题，都没问题的话测试一下泵的流速看有没有问题

换过柱子，还是有问题，怀疑是检测器灯的问题，测试软件测试确实没通过，就用异丙醇小流速冲了，后来灯检测通过，可是平衡时间还是一样长。可能是哪个地方密封性不好吗？有时压力也会忽上忽下。
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5楼2013-02-02 21:34:26
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年年糕

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 容月~ at 2013-02-02 10:43:43
把流动相混一起走呢  是不是比列阀的问题  流动相脱气 灯看能量是否还够   流动相里面是不是有离子对试剂等 等会是基线不平  换柱子试试

没有离子对试剂走过乙腈水的流动相
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6楼2013-02-02 21:35:43
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年年糕

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by heyo_123 at 2013-02-02 10:46:13
平衡时间长短和柱长、流动相也有关系…柱越长所需时间也越长…若是缓冲盐体系做流动相平衡时间会很长…泵的稳定性也很重要…建议分段验证…

用乙腈水也要平衡好长时间，灯是新换过的
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7楼2013-02-02 21:37:10
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容月~

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 年年糕 at 2013-02-02 21:37:10
用乙腈水也要平衡好长时间，灯是新换过的...

哦  这样呀  混在一起走过没有?  混在一起走都是好得 可能就是比列阀有问题了  还有主动伐   如果是好得  那可能就是柱子性质了
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有希望就会有奇迹
8楼2013-02-03 10:47:06
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wy1518

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

流动相比例如何？看看是不是因为检测器负压问题导致基线不稳

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10楼2013-02-03 11:46:26
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