| 查看: 3083 | 回复: 11 | |||
落雪含香金虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助】HPLC基线漂移问题 已有9人参与
|
|
我的HPLC的流动相是 A：含TFA0.01%的水 B：含TFA0.01%的乙腈 用5%~95%的B梯度洗脱，测定波长为220，柱子平衡了一个多小时，但是还是基线漂移，就连进样量为零的时候，都漂移，空白溶剂也漂移，样品也漂移，但是可以看到样品比空白溶剂多一个小小峰，这是怎么回事？我还能继续做吗？如何解决呢？ 谢谢大家的回复，我后来把检测波长换成270nm了，基线虽然还是有些漂移，但已经好多了，样品的峰也明显了，我想应该还是梯度洗脱与检测波长的原因，机器还是一年前买的，不会是机器故障，流动相都是用的HPLC级别的，并过滤除气，流动相的影响不大。TFA我是必须加入到流动相中，用于保护我的样品，因为样品里面有多肽。 谢谢大家的热心回复 [ Last edited by 落雪含香 on 2011-4-6 at 11:23 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- HPLC中关于峰面积积分问题
已经有19人回复
- 为什么液相色谱基线严重漂移？
已经有18人回复
- HPLC 基线很不稳定怎么回事？
已经有13人回复
- 关于高效液相色谱法基线波动和基线漂移等引发因素的一些小结
已经有75人回复
- 【求助】HPLC的基线漂移并有杂质峰
已经有3人回复
- 【求助】样品出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重？
已经有12人回复
- 【求助】HPLC基线向上漂移的问题
已经有10人回复
- 【求助】HPLC基线上漂
已经有12人回复
- 【求助】我走高效液相色谱的基线为什么会这样？（这次图可以看到了）
已经有19人回复
- 【求助/交流】我走高效液相色谱的基线为什么会这样？（现在可以看到图了）
已经有11人回复
- HPLC的砂芯漏斗，流动相，柱子保存问题
已经有13人回复
痴夷子皮
版主 (文坛精英)
老痞
- PhEPI: 10
- 应助: 2016 (讲师)
- 贵宾: 5.368
- 金币: 54487.3
- 散金: 41688
- 红花: 303
- 沙发: 1206
- 帖子: 32611
- 在线: 4303.7小时
- 虫号: 674536
- 注册: 2008-12-14
- 性别: GG
- 专业: 无神论
- 管辖: 人文社科
2楼2011-03-29 20:52:59
3楼2011-03-30 18:09:54
zgf340631735
至尊木虫 (文坛精英)
- PhEPI: 7
- 应助: 36 (小学生)
- 贵宾: 0.1
- 金币: 39293.6
- 红花: 14
- 沙发: 133
- 帖子: 23680
- 在线: 481.8小时
- 虫号: 985556
- 注册: 2010-03-30
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
4楼2011-03-30 19:24:10
5楼2011-03-30 19:36:00
zhengyi
木虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3917.5
- 散金: 219
- 红花: 2
- 帖子: 1894
- 在线: 745.2小时
- 虫号: 138089
- 注册: 2005-12-18
- 专业: 化学生物学与生物有机化学
6楼2011-03-30 19:38:34
7楼2011-04-02 17:09:57
coffee57165
金虫 (小有名气)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 1135.4
- 红花: 1
- 帖子: 256
- 在线: 37.4小时
- 虫号: 1228598
- 注册: 2011-03-10
- 性别: GG
- 专业: 环境分析化学
8楼2011-04-02 17:24:44
娟铝
木虫 (著名写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 2698.2
- 散金: 501
- 红花: 5
- 帖子: 1893
- 在线: 102.6小时
- 虫号: 823060
- 注册: 2009-08-06
- 专业: 中药制剂
9楼2011-04-02 18:21:36
novus
铁杆木虫 (著名写手)
- PhEPI: 4
- 应助: 8 (幼儿园)
- 贵宾: 0.542
- 金币: 5439.8
- 散金: 830
- 红花: 14
- 沙发: 6
- 帖子: 1518
- 在线: 298.1小时
- 虫号: 1057196
- 注册: 2010-07-14
- 性别: GG
- 专业: 分析仪器与试剂
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
|
由于TFA本身是有紫外吸收，往往在水和乙腈溶液中的紫外吸收也是不一样的（在220nm时TFA-乙腈高于TFA-水，210nm正好相反），所以你会发现你的基线是会随着乙腈的比例增加而一直往上飘直到95%保持不变，这个是正常现象。 不同厂家生产的HPLC级的TFA质量不尽相同，就我个人经历发现只有少数几家的（新开瓶的）TFA配流动相走基线不会有小杂峰，不同厂家生产的TFA形成的杂峰都不一样的，这个实际就是TFA里面的有强紫外吸收的杂质，大部分情况下对于我们日常分析都不会有太大影响，偶尔碰到做杂质检查时可能会干扰测定，这时要么换进口的高质量TFA（推荐 J.T.Baker的），要么改改梯度分开它们。 |
10楼2011-04-02 20:20:13
