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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】HPLC基线漂移问题
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落雪含香

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC基线漂移问题 已有9人参与

我的HPLC的流动相是  A：含TFA0.01%的水  B：含TFA0.01%的乙腈     用5%~95%的B梯度洗脱，测定波长为220，柱子平衡了一个多小时，但是还是基线漂移，就连进样量为零的时候，都漂移，空白溶剂也漂移，样品也漂移，但是可以看到样品比空白溶剂多一个小小峰，这是怎么回事？我还能继续做吗？如何解决呢？


谢谢大家的回复，我后来把检测波长换成270nm了，基线虽然还是有些漂移，但已经好多了，样品的峰也明显了，我想应该还是梯度洗脱与检测波长的原因，机器还是一年前买的，不会是机器故障，流动相都是用的HPLC级别的，并过滤除气，流动相的影响不大。TFA我是必须加入到流动相中，用于保护我的样品，因为样品里面有多肽。


谢谢大家的热心回复

[ Last edited by 落雪含香 on 2011-4-6 at 11:23 ]
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1楼 2011-03-29 20:48:51
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娟铝

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对，主要是220nm，比较低。另外，进样伐要注意清洗。可以用50%硝酸超声处理。
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9楼2011-04-02 18:21:36
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
jiangchunyong(金币+2): 谢谢！ 2011-03-29 21:45:45
不能继续做。先解决漂移的问题再做。
1、流动相原因。
2、管路污染。
3、检测池污染或有气泡。
4、氘灯寿命已尽。
5、电源电压不稳。
6、检测器电路板故障。
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守候在风中的宁静。
2楼2011-03-29 20:52:59
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宥野

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
中药2000(金币+1): 热心助人。 2011-04-02 20:32:07
一般走梯度，或多或少都会飘，只要飘的不是太高就行。你所说的多一小杂质，可能是你的进样阀或进样针没洗干净，或是你的溶剂交叉污染等原因。
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3楼2011-03-30 18:09:54
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
中药2000(金币+1): 热心助人。 2011-04-02 20:32:38
你的检测波长挺低的，梯度基线飘很普遍，在可接受的范围就行。挂上张图看看
赞一下(2人) 回复此楼
学无止境
4楼2011-03-30 19:24:10
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