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txzhuwenxiu6285

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】求PCR二次扩增引物

我做的是厌氧反应器中微生物群落的变化，现在已经做好DGGE了，下面就是胶回收后在PCR，然后测序。我第一次PCR时用的引物是341FGC和534R，想二次扩增时用引物GC2-341和534R，以及测序之前用引物GC1-S和534R，请问哪位高手能告诉我GC2-341和GC1-S的引物序列，我想让上海生工帮我合成，万分感谢！！！急！！！！

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1楼 2011-03-29 16:07:04

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txzhuwenxiu6285

新虫 (初入文坛)

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dhd997(金币+3): 热心。 2011-04-01 08:43:41

引用回帖:

Originally posted by nienie2008 at 2011-03-30 15:38:06:
我也想做类似的实验，楼主能写明回收试剂盒的具体名称吗？我上网查了，大部分试剂盒都是针对琼脂糖凝胶的。另外，不知楼主从哪查的这些引物，用PCR引物测序不行吗？

上海生工的UNIQ-10柱式PAGE胶回收试剂盒你可以到他们公司页面上下载这个试剂盒的PDF说明，看看你能不能用；另外，你是不是研究的具体的哪个微生物，然后PCR产物可以直接测序，而我的是一个反应器中的整个微生物菌群，所以我是做完DGGE后，将优势菌种的条带切下，然后回收，再PCR，最后再测序的，而上面两个引物就是我二次增幅所想要用的引物，但是我一直找不到这个序列，所以纠结，虽然用之前的引物也可以，但可能扩增的特异性不好，那样测序的结果可能不太好。