应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】BamHI酶切
51/1返回列表
查看: 2566  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】BamHI酶切 已有15人参与

我用Takara的BamHI酶按照说明书上的反应液在30℃下切2小时，没能切成功。
我的质粒中含有BamHI和NdeI酶切位点。
图中第一个是Marker，第二个是没有进行酶切的质粒，第三个和第四个是用BamHI酶切后的条带，第五个是用NdeI酶切的条带，用NdeI酶切能切成功，但BamHI酶切好像没把质粒切开。请各位大侠帮忙分析下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
努力会有收获！
1楼 2011-03-28 10:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙中清泉

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
BamHI我也用过，应该没问题，质粒少加一点试试
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-03-28 19:56:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 说的很好~~~ 2011-03-28 17:46:30
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点，NdeI呢？
2：你的胶配的不太好，好多气泡！
3：你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大？

建议以后提问的时候把问题说清，这样才便于大家给你解决问题！
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-03-28 15:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 15:22:04:
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点，NdeI呢？
2：你的胶配的不太好，好多气泡！
3：你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大？

建议以后提问的时候把问题说清，这样才便于大家给你解 ...

质粒上是一个BamHI酶切位点，一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的，是胶下面垫了一层塑料纸，胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp，10085bp，8023bp，6133bp，5026bp，3997bp，3049bp，2087bp。质粒本身大小是5.4kb
赞一下 回复此楼
努力会有收获！
3楼2011-03-28 16:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-28 20:14:43
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-03-28 16:19:05:
质粒上是一个BamHI酶切位点，一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的，是胶下面垫了一层塑料纸，胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp，10085bp，8023bp，6133bp，5026bp，3997bp，3049bp，2087bp ...

那有可能是你没有切开，建议重新酶切试试，酶切时间可以稍微长一些！

还有你的marker怎么那么奇怪呢？为什么都不是整数？

你的条带拖尾太严重了，上样可以少一些！
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-03-28 16:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 求调剂 +5 yunziaaaaa 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:57 by ccp273206157
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:31 by L135790
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭