应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】BamHI酶切
51/1返回列表
查看: 2591  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】BamHI酶切 已有15人参与

我用Takara的BamHI酶按照说明书上的反应液在30℃下切2小时，没能切成功。
我的质粒中含有BamHI和NdeI酶切位点。
图中第一个是Marker，第二个是没有进行酶切的质粒，第三个和第四个是用BamHI酶切后的条带，第五个是用NdeI酶切的条带，用NdeI酶切能切成功，但BamHI酶切好像没把质粒切开。请各位大侠帮忙分析下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
努力会有收获！
1楼 2011-03-28 10:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-28 20:14:43
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-03-28 16:19:05:
质粒上是一个BamHI酶切位点，一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的，是胶下面垫了一层塑料纸，胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp，10085bp，8023bp，6133bp，5026bp，3997bp，3049bp，2087bp ...

那有可能是你没有切开，建议重新酶切试试，酶切时间可以稍微长一些！

还有你的marker怎么那么奇怪呢？为什么都不是整数？

你的条带拖尾太严重了，上样可以少一些！
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-03-28 16:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 说的很好~~~ 2011-03-28 17:46:30
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点，NdeI呢？
2：你的胶配的不太好，好多气泡！
3：你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大？

建议以后提问的时候把问题说清，这样才便于大家给你解决问题！
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-03-28 15:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 15:22:04:
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点，NdeI呢？
2：你的胶配的不太好，好多气泡！
3：你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大？

建议以后提问的时候把问题说清，这样才便于大家给你解 ...

质粒上是一个BamHI酶切位点，一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的，是胶下面垫了一层塑料纸，胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp，10085bp，8023bp，6133bp，5026bp，3997bp，3049bp，2087bp。质粒本身大小是5.4kb
赞一下 回复此楼
努力会有收获！
3楼2011-03-28 16:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 16:36:59:
那有可能是你没有切开，建议重新酶切试试，酶切时间可以稍微长一些！

还有你的marker怎么那么奇怪呢？为什么都不是整数？

你的条带拖尾太严重了，上样可以少一些！

我还跑了双酶切的，是过夜酶切，也只有NdeI能切开。那时间可不短了啊？我看有人说酶切时间长的话也不好。会不会切开之后又连接上呢？这种酶你用过吗？它有什么特殊要求吗？
赞一下 回复此楼
努力会有收获！
5楼2011-03-28 16:41:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +6 2117205181 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:59 by allen-yin
[考研] 一志愿070300浙大化学358分，求调剂！ +3 酥酥鱼.. 2026-03-21 3/150 2026-03-22 11:31 by 杨杨杨紫
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿深大，0703化学，总分302，求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭