24小时热门版块排行榜    

查看: 2573  |  回复: 27
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】BamHI酶切 已有15人参与

我用Takara的BamHI酶按照说明书上的反应液在30℃下切2小时,没能切成功。
我的质粒中含有BamHI和NdeI酶切位点。
图中第一个是Marker,第二个是没有进行酶切的质粒,第三个和第四个是用BamHI酶切后的条带,第五个是用NdeI酶切的条带,用NdeI酶切能切成功,但BamHI酶切好像没把质粒切开。请各位大侠帮忙分析下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

努力会有收获!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 15:22:04:
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点,NdeI呢?
2:你的胶配的不太好,好多气泡!
3:你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大?

建议以后提问的时候把问题说清,这样才便于大家给你解 ...

质粒上是一个BamHI酶切位点,一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的,是胶下面垫了一层塑料纸,胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp,10085bp,8023bp,6133bp,5026bp,3997bp,3049bp,2087bp。质粒本身大小是5.4kb
努力会有收获!
3楼2011-03-28 16:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 说的很好~~~ 2011-03-28 17:46:30
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点,NdeI呢?
2:你的胶配的不太好,好多气泡!
3:你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大?

建议以后提问的时候把问题说清,这样才便于大家给你解决问题!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-03-28 15:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-28 20:14:43
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-03-28 16:19:05:
质粒上是一个BamHI酶切位点,一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的,是胶下面垫了一层塑料纸,胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp,10085bp,8023bp,6133bp,5026bp,3997bp,3049bp,2087bp ...

那有可能是你没有切开,建议重新酶切试试,酶切时间可以稍微长一些!

还有你的marker怎么那么奇怪呢?为什么都不是整数?

你的条带拖尾太严重了,上样可以少一些!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-03-28 16:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 16:36:59:
那有可能是你没有切开,建议重新酶切试试,酶切时间可以稍微长一些!

还有你的marker怎么那么奇怪呢?为什么都不是整数?

你的条带拖尾太严重了,上样可以少一些!

我还跑了双酶切的,是过夜酶切,也只有NdeI能切开。那时间可不短了啊?我看有人说酶切时间长的话也不好。会不会切开之后又连接上呢?这种酶你用过吗?它有什么特殊要求吗?
努力会有收获!
5楼2011-03-28 16:41:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:31 by L135790
[基金申请] 成果系统访问量大,请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦,已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
请填处理意见