应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】BamHI酶切
51/1返回列表
查看: 2568  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】BamHI酶切 已有15人参与

我用Takara的BamHI酶按照说明书上的反应液在30℃下切2小时，没能切成功。
我的质粒中含有BamHI和NdeI酶切位点。
图中第一个是Marker，第二个是没有进行酶切的质粒，第三个和第四个是用BamHI酶切后的条带，第五个是用NdeI酶切的条带，用NdeI酶切能切成功，但BamHI酶切好像没把质粒切开。请各位大侠帮忙分析下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
努力会有收获！
1楼 2011-03-28 10:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 16:47:28:
BamHI 我用过，完全没有问题的，buffer没有什么问题吧？你可以再尝试着酶切一下！

用的buffer是takara的，应该没问题，那我就延长时间试试吧。谢了
赞一下 回复此楼
努力会有收获！
7楼2011-03-28 16:55:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 说的很好~~~ 2011-03-28 17:46:30
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点，NdeI呢？
2：你的胶配的不太好，好多气泡！
3：你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大？

建议以后提问的时候把问题说清，这样才便于大家给你解决问题！
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-03-28 15:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 15:22:04:
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点，NdeI呢？
2：你的胶配的不太好，好多气泡！
3：你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大？

建议以后提问的时候把问题说清，这样才便于大家给你解 ...

质粒上是一个BamHI酶切位点，一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的，是胶下面垫了一层塑料纸，胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp，10085bp，8023bp，6133bp，5026bp，3997bp，3049bp，2087bp。质粒本身大小是5.4kb
赞一下 回复此楼
努力会有收获！
3楼2011-03-28 16:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-28 20:14:43
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-03-28 16:19:05:
质粒上是一个BamHI酶切位点，一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的，是胶下面垫了一层塑料纸，胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp，10085bp，8023bp，6133bp，5026bp，3997bp，3049bp，2087bp ...

那有可能是你没有切开，建议重新酶切试试，酶切时间可以稍微长一些！

还有你的marker怎么那么奇怪呢？为什么都不是整数？

你的条带拖尾太严重了，上样可以少一些！
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-03-28 16:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +6 YXCT 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:21 by 向上的胖东
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭