应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】BamHI酶切
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 2643  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】BamHI酶切 已有15人参与

我用Takara的BamHI酶按照说明书上的反应液在30℃下切2小时，没能切成功。
我的质粒中含有BamHI和NdeI酶切位点。
图中第一个是Marker，第二个是没有进行酶切的质粒，第三个和第四个是用BamHI酶切后的条带，第五个是用NdeI酶切的条带，用NdeI酶切能切成功，但BamHI酶切好像没把质粒切开。请各位大侠帮忙分析下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
努力会有收获！
1楼 2011-03-28 10:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 16:47:28:
BamHI 我用过，完全没有问题的，buffer没有什么问题吧？你可以再尝试着酶切一下！

用的buffer是takara的，应该没问题，那我就延长时间试试吧。谢了
赞一下 回复此楼
努力会有收获！
7楼2011-03-28 16:55:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 说的很好~~~ 2011-03-28 17:46:30
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点，NdeI呢？
2：你的胶配的不太好，好多气泡！
3：你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大？

建议以后提问的时候把问题说清，这样才便于大家给你解决问题！
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-03-28 15:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 15:22:04:
问题:
1:你的质粒上面几个BamHI酶切位点，NdeI呢？
2：你的胶配的不太好，好多气泡！
3：你的marker怎么跑出来是这样子?最大多少。从上到下依次多大？

建议以后提问的时候把问题说清，这样才便于大家给你解 ...

质粒上是一个BamHI酶切位点，一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的，是胶下面垫了一层塑料纸，胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp，10085bp，8023bp，6133bp，5026bp，3997bp，3049bp，2087bp。质粒本身大小是5.4kb
赞一下 回复此楼
努力会有收获！
3楼2011-03-28 16:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-28 20:14:43
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-03-28 16:19:05:
质粒上是一个BamHI酶切位点，一个NdeI酶切位点。那气泡不是胶上的，是胶下面垫了一层塑料纸，胶跟塑料之间的气泡。我的Marker从上到下依次是11849bp，10085bp，8023bp，6133bp，5026bp，3997bp，3049bp，2087bp ...

那有可能是你没有切开，建议重新酶切试试，酶切时间可以稍微长一些！

还有你的marker怎么那么奇怪呢？为什么都不是整数？

你的条带拖尾太严重了，上样可以少一些！
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-03-28 16:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +17 luoziheng 2026-04-10 17/850 2026-04-14 08:52 by 木木mumu～
[考研] 本科西工大 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-13 23:08 by pies112
[考研] 考研调剂 +11 长弓傲 2026-04-13 12/600 2026-04-13 22:48 by pies112
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 53/2650 2026-04-13 14:20 by 张zhihao
[考研] 生物学308分求调剂（一志愿华东师大）做过分子实验 +9 相信必会光芒万� 2026-04-07 10/500 2026-04-13 10:20 by 可淡不可忘
[考研] 266调剂 +10 daya sun 2026-04-07 11/550 2026-04-13 10:12 by fenglj492
[考研] 0831生医工第一轮调剂失败求助 +12 小熊睿睿_s 2026-04-11 16/800 2026-04-12 16:28 by 钰璞
[考研] 296求调剂 +14 汪！？！ 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 药学305求调剂 +8 玛卡巴卡boom 2026-04-10 8/400 2026-04-12 00:07 by zhouwenxian
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 农学0904 312求调剂 +6 Say Never 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:33 by wwj2530616
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 275求调剂 +9 1624447980 2026-04-08 10/500 2026-04-11 10:20 by Delta2012
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-08 12/600 2026-04-09 14:27 by rl1980
[考研] 一志愿华南师范大学0702物理学305调剂 +4 念常安 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:53 by bljnqdcc
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 275 求调剂 +8 Lei812514 2026-04-07 8/400 2026-04-08 12:46 by chemisry
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭