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liuwei78

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】大家帮忙看一张电泳图

这是张单酶切的电泳图。我原来的质粒大小是5700bp左右，预计插入一个817bp的片段。连接转化后挑了六个单菌落，其中有三个菌液PCR有预期结果。然后我就提质粒单酶切。结果竟然都有两三个条带，不知道问题出在哪？而且从条带位置上看，中间一个条带的位置是我预期的6500多bp。求大家帮忙分析下。

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1楼 2011-03-28 10:44:04

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liuwei78

铜虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by 天使托 at 2011-03-28 15:37:43:
单酶切验证，你确定你的质粒和插入片段上只有一个此酶切位点吗？我看有三个，不然怎么会切出来三条带呢？
一般做酶切验证是这样子的，把重组质粒用你当初的两个酶进行酶切，然后跑电泳时点上对照（原来酶切的质粒 ...

我用的是当初那个酶酶切的，理论上其他位置上没有这个酶切位点。