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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 【求助】样品出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重？
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laoyisng1122

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助】样品出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重？已有7人参与

在用HPLC-UV分析 isospinosin,,, spinosin  。首先，这两个化合物是7位和8位的取代基位置互换，其他都一样。在甲醇-水流动相中能分离开，洗脱梯度为70%aq-0；时间为 0-60min，出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重。换乙腈-水后，怎么也分不开。怎么办？？？
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1楼2011-03-28 00:27:16
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柳酚咖敏

银虫 (小有名气)
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xiaodu2007693(金币+1): 谢谢交流 2011-04-01 20:13:05
你的样品是不是只有这两个物质出峰啊，如果只是两个物质混合的话，这个梯度设计很有问题啊，
两个东西30分钟都能出峰的话，就没必要再继续让梯度走下去了呀；而且你没必要把初始有机相比例设得那么低。用甲醇-水走梯度，基线漂是正常的。
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桂棹兮兰桨，击空明兮溯流光。渺渺兮于怀，望美人兮天一方-
5楼2011-03-28 17:24:21
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柳酚咖敏

银虫 (小有名气)
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引用回帖:
Originally posted by laoyisng1122 at 2011-04-01 19:55:13:
首先很感谢朋友的积极建议。 由于我的样品至少需要检测5个峰以上，所以，检测范围比较宽。用70％水：30甲醇－0％水：100％甲醇，时间：0－60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的，然后20min左右是第二个峰。 ...

如果你要分离的两个化合物是异构体的话，甚至手型异构体，那这个方法可能很不好建立。
即使你能勉强做到基线分离，可能方法的耐用性也要打折扣的。
手性拆分，还是手性柱给力啊！
祝好运！
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桂棹兮兰桨，击空明兮溯流光。渺渺兮于怀，望美人兮天一方-
10楼2011-04-02 10:35:01
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