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【求助/交流】一抗稀释问题
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晴天1882
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【求助/交流】一抗稀释问题
做western bloting实验,如果一抗用水稀释了,会有什么后果?
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2011-03-25 20:15:42
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terry130
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lstt09nk(金币+3): 说的很不错哦~~ 2011-03-27 13:08:38
引用回帖:
Originally posted by
晴天1882
at 2011-03-25 20:15:42:
做western bloting实验,如果一抗用水稀释了,会有什么后果?
用水稀释肯定影响抗体与蛋白的结合。你block用什么溶液,就用它稀释抗体。一般都是用5% fat free milk,有钱的话可以用1%BSA,这些都是溶在PBS-T 或者TBS-T中的。其实单用PBS-T去稀释1抗的效果也不错,对于一些痕量蛋白的检测这种方式也许会更好,但是后续洗膜的时间和强度都要加大,否则背景容易过高。
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4楼
2011-03-26 09:45:56
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★
lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-03-27 13:09:23
抗体很容易降解
你补点高浓度的TBST进去吧
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3楼
2011-03-26 09:33:22
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jhu132llh
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lstt09nk(金币+1): 鼓励交流,欢迎常来 2011-03-27 13:09:07
马上按浓度补上高浓度的TBST到正常
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5楼
2011-03-26 10:51:43
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引用回帖:
Originally posted by
jhu132llh
at 2011-03-26 10:51:43:
马上按浓度补上高浓度的TBST到正常
如果已经过了一个星期怎么办?
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6楼
2011-03-26 19:53:04
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