应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于免疫荧光的问题，期待您的回复
101/1返回列表
查看: 1527  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

shwkx1987

新虫 (小有名气)

[交流] 关于免疫荧光的问题，期待您的回复 已有4人参与

各位高手，小弟刚开始做贴壁细胞的间接免疫荧光（爬片），做的效果不是很好，怀疑是一抗和二抗孵育的不好，想请教各位做过的高手，在加一抗和二抗这两个步骤时是怎么处理的。期待您的指点。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-13 15:22:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不孤鸟

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-09-17 08:18:22
一抗二抗只要覆盖住玻片就行了，不用加很多，浪费。一般按照说明书的推荐进行稀释。
你的效果不好大概指什么，不够亮还是部位不够确切呢？
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-09-14 13:31:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shwkx1987

新虫 (小有名气)
恩，就是不够亮。
回复此楼
3楼2011-09-16 20:53:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

筱?�

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-09-17 12:56:10
我在加一抗之前先用透膜液处理了30分钟，但是最后结果也是不够亮，但是比没有透膜的效果好多了
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-09-17 09:15:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shwkx1987

新虫 (小有名气)
???????:
4?: Originally posted by ???? at 2011-09-17 09:15:02:
???????????????????????30????????????????????????????????????Ч???????

?????PBS??pH?????????????pH????????
赞一下 回复此楼
5楼2011-09-22 14:17:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shwkx1987

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 不孤鸟 at 2011-09-14 13:31:09:
一抗二抗只要覆盖住玻片就行了，不用加很多，浪费。一般按照说明书的推荐进行稀释。
你的效果不好大概指什么，不够亮还是部位不够确切呢？

恩。就是荧光不够亮。我把抗体浓度增大还是一样的效果，会不会是pbs的pH不合适呢
赞一下 回复此楼
6楼2011-09-22 14:18:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

筱?�

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by shwkx1987 at 2011-09-22 14:17:10:
你用的PBS的pH是多少啊？你觉得pH的影响大吗？

pH是7.4，洗液pH是7.6，应该不是pH的问题，我后来做了另外一个蛋白的荧光染色，荧光强度就比之前的好，不知道是不是抗体的问题。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-09-22 15:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shwkx1987

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 不孤鸟 at 2011-09-14 13:31:09:
一抗二抗只要覆盖住玻片就行了，不用加很多，浪费。一般按照说明书的推荐进行稀释。
你的效果不好大概指什么，不够亮还是部位不够确切呢？

你好。你用的玻片是多大的？我用的是普通盖玻片，放在载玻片上操作的。一抗二抗加上去后，稍有不平就回流掉。现在就这一难题找不到解决办法，你能与我分享下你的经验吗？
赞一下 回复此楼
8楼2011-09-28 14:41:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elon_ma

禁言 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
9楼2012-05-08 20:11:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

废哥117

银虫 (小有名气)
引用回帖:
1955047楼: Originally posted by shwkx1987 at 2011-09-28 14:41:48
你好。你用的玻片是多大的？我用的是普通盖玻片，放在载玻片上操作的。一抗二抗加上去后，稍有不平就回流掉。现在就这一难题找不到解决办法，你能与我分享下你的经验吗？...

应该不会流掉啊，你把一抗二抗滴到盖玻片上，由于表面张力会形成一个椭球状（注意不要加太多，一般的小圆盖玻片40或者50ul就可以了），掌握好这个度你的一抗二抗应该不会流出的，操作一定要轻柔，尤其是封片的时候，不要一下盖上去，不然会有气泡，而且也会影响细胞形态
赞一下 回复此楼
不断提高自己
10楼2012-05-30 13:37:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shwkx1987 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +6 Ncdx123456 2026-03-13 7/350 2026-03-16 07:44 by L135790
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 化学工程321分求调剂（南京工业，浙江工业） +3 大米饭！ 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:34 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分，求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 快乐的香蕉 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] 0703，333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 材料调剂，307分 +13 张泳铭1 2026-03-09 17/850 2026-03-13 11:09 by 薛云鹏
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-12 5/250 2026-03-13 10:56 by houyaoxu
[考博] 读博申请 +5 感dd 2026-03-10 7/350 2026-03-11 17:02 by QGZDSYS
[基金申请] 提交后的基金本子，已让学校撤回了，可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭