| 查看: 1459 | 回复: 3 | ||
[求助]
请教一个关于BHK-21细胞瞬时转染的问题
|
|
各位大侠，我最近在做瞬时转染。用的是脂质体转染法，载体是pcDNA3.1，插入了一个干扰素的基因，用碱裂解法大量提取的质粒，OD260nm/280nm为1.9，应该很纯了。我转染了阳性质粒，同时转染了空载体做阴性对照，还有空细胞做阴性对照。 转染两天后做间接免疫荧光，一抗为我自己做的多抗血清（阳性血清和阴性血清），二抗为商业化的荧光二抗，结果奇怪的是虽然我的阳性质粒出现了荧光，但是我的阴性血清对照，空载体阴性对照和空细胞阴性对照也都出现了荧光，而且荧光和阳性质粒一样明显。 已经重复做了三次试验，结果都是这样的，而且更换过一抗和空载体，真的是找不出原因了。  恳请大家帮忙！万分感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有11人回复
-
不自信的我
已经有12人回复
-
假如你的研究生提出不合理要求
已经有5人回复
-
所感
已经有4人回复
-
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有28人回复
-
要不要辞职读博？
已经有7人回复
-
北核录用
已经有3人回复
-
实验室接单子
已经有3人回复
-
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有8人回复
-
26申博（荧光探针方向，有机合成）
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教一个问题，本人的一些理解，不知道对不对
已经有6人回复
- (悬赏50金币)请教一个非阿贝尔反常问题
已经有5人回复
- 我是新手想请教一个关于细胞铺板的问题
已经有4人回复
- 有大侠养细胞么？问一个传代的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】请教一个制备感受态细胞中的问题
已经有10人回复
- 【求助】—————————————请教一个醇分子内脱水的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】农杆菌瞬时转染植物悬浮细胞后能除掉吗？回帖就送币！
已经有18人回复
- 【求助】请教大家一个关于紫外光引发丙烯酸聚合的问题
已经有8人回复
小周
铁杆木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 42 (小学生)
- 金币: 11329.6
- 散金: 20
- 红花: 10
- 沙发: 1
- 帖子: 1324
- 在线: 560.7小时
- 虫号: 688224
- 注册: 2009-01-05
- 性别: MM
- 专业: 抗体工程学
2楼2011-11-02 11:46:53
linyingjia
至尊木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 105 (高中生)
- 贵宾: 0.139
- 金币: 24730.4
- 散金: 1
- 红花: 22
- 帖子: 3968
- 在线: 234.5小时
- 虫号: 668860
- 注册: 2008-12-05
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
3楼2011-11-02 14:25:24
Explor
新虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1554.8
- 散金: 88
- 红花: 2
- 帖子: 775
- 在线: 168.8小时
- 虫号: 8160133
- 注册: 2018-03-05
- 专业: 生物化学
4楼2019-11-20 11:05:35