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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒浓度达到多少 测序没有问题
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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒浓度达到多少 测序没有问题

提取质粒送去测序 ，测序之前想测一下质粒浓度，浓度多大 测序没问题呢
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1楼 2011-03-20 22:45:05
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
10ng/ul以上肯定可以吧
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2楼2011-03-20 23:12:00
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)
只要质量好,一般试剂盒小提的都不错
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3楼2011-03-20 23:48:37
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翱宇

禁虫 (正式写手)
多给一些吧，这洗脱时多加点洗脱液，就好了，不知为何不送菌种呢，好像送质粒必须以ddH2O溶解！
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4楼2011-03-20 23:50:50
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roomofxw

木虫 (正式写手)
送质粒，告诉公司浓度很低，让他们自己转化了，再提质粒，LZ自己就等着测序结果就好了
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5楼2011-03-21 09:03:47
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zhangby2002

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xnbioinfor at 2011-03-20 22:45:05:
提取质粒送去测序 ，测序之前想测一下质粒浓度，浓度多大 测序没问题呢

我菌液也送过。质粒也送过，质粒用碱裂解发粗提取，质粒都达到1000多，至2000-3000ng,也有几百ng,但是测序还有套峰，效果不好。也比较纠结！
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6楼2011-03-21 14:54:47
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zhangby2002

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by roomofxw at 2011-03-21 09:03:47:
送质粒，告诉公司浓度很低，让他们自己转化了，再提质粒，LZ自己就等着测序结果就好了

请教一下，你测序结果很好吗、？你质粒提取，用的试剂盒or碱裂解发粗提取？核算定量多少ng??
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7楼2011-03-21 14:57:13
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walker2898

银虫 (小有名气)
直接送菌液就行了，让他们提质粒测序就可以了。
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8楼2011-03-21 15:02:08
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roomofxw

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhangby2002 at 2011-03-21 14:57:13:
请教一下，你测序结果很好吗、？你质粒提取，用的试剂盒or碱裂解发粗提取？核算定量多少ng??

测序结果挺好的啊
试剂盒提过 自己配试剂也提过 都还可以啊
我是pET拷贝很低，浓度不怎么样，有时候胶上勉强看得见，但是测序没什么问题
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9楼2011-03-21 15:37:42
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orangeleaf

铜虫 (正式写手)
送菌液吧
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10楼2011-03-21 18:38:39
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csdyg

木虫 (正式写手)
一般sanger法测序，质粒300ng足够一次测序，为了保证测序质量，一般在600-700ng之间为宜

样品浓度过大，如果不向测序公司说明，会影响测序效果，严重时可能有损测序仪

[ Last edited by csdyg on 2011-3-22 at 06:20 ]
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11楼2011-03-22 06:19:10
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