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【求助/交流】分子克隆后M13引物PCR扩增
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-超越beyond
铁虫
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虫号: 936797
[交流]
【求助/交流】分子克隆后M13引物PCR扩增
我用的载体是pMD 19 ,插入片段是16S,挑克隆后用通用M13引物扩增,结果死活扩不出来,快急死我了,大家有没有同样的情况。这应该怎么办啊
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2011-03-18 10:15:28
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vs570588
木虫
(正式写手)
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帖子: 923
在线: 420.6小时
虫号: 822119
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
不可能扩不出来,你的意思是菌落PCR后,电泳没有条带吗?
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20楼
2011-03-20 20:42:09
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lxj341401
至尊木虫
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虫号: 111074
-超越beyond(金币+1): 谢谢 2011-03-19 17:04:16
重新挑取克隆试试。
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2楼
2011-03-18 10:34:58
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-超越beyond
铁虫
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虫号: 936797
引用回帖:
Originally posted by
lxj341401
at 2011-03-18 10:34:58:
重新挑取克隆试试。
重新挑了还是不行啊
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3楼
2011-03-18 10:59:57
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振子
新虫
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帖子: 191
在线: 100.6小时
虫号: 1193877
你好
-超越beyond(金币+1): 谢谢 2011-03-19 17:04:05
你所谓的扩不出来是没有阳性是吧?
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4楼
2011-03-18 11:39:01
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-超越beyond
12楼
2011-03-19 16:47
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引用回帖:
Originally posted by
zqhao2003
at 2011-03-19 00:02:56: 楼主是用的下面这对引物吗?可以用这对引物试试,Tm 55或53都可以。 M13F(-47) CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC M13R(-48) AGCGGATAACAATTTCACACAGGA 我们一般测序都是用这对引物的,很好用,扩PCR应该没有问题。 祝 ...
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